[发明专利]一种AChE/GC‑HBAP/Pty/TNs光电化学酶传感器的制备方法和应用

摘要

本发明公开一种AChE/GC‑HBAP/Pty/TNs光电化学酶传感器的制备方法和应用，其特征在于包括1)TNs电极的制备；2)单分子GC‑HBAP纳米颗粒的制备；3)AChE/GC‑HBAP/Pty/TNs复合体系的建立；通过交联剂固定乙酰胆碱酯酶制备了具有可见光活性的光电化学酶传感器,并应用于氯氮平对AChE活性影响的研究，发现氯氮平对AChE活性的影响具有底物依赖性，且在一定浓度范围内表现为激活效应。研究结果为进一步研究AChE活性及其在有AChE活性变化引起疾病的致病机理、药物开发、诊断以及用药剂量指导等方面提供了有意义的实验依据。

主权项

一种AChE/GC‑HBAP/Pty/TNs光电化学酶传感器的制备方法，其特征在于包括：1)TNs电极的制备将金属钛片打磨至镜面，依次浸在丙酮、乙醇、蒸馏水中超声十分钟，再浸在氢氟酸和硝酸的混合液中进行化学抛光分钟，取出立刻用丙酮和蒸馏水依次冲洗，在室温下晾干，电极在自制的柱状电解池里中制备钛片为阴极，四支呈对称分布的石墨电极为阳极；2)单分子GC‑HBAP纳米颗粒的制备a合成金胶体溶液(GC)：参考Duff法合成GC；b单分子聚合物纳米颗粒的合成；c单分子纳米颗粒GC‑HBAP的合成；3)AChE/GC‑HBAP/Pty/TNs复合体系的建立采用循环伏安法在TNs表面电聚合酪胺，三电极系统：工作电极为所制备的TNs电极，辅助电极为铂丝电极，参比电极为饱和甘汞电极(SCE)；以含有0.3mol酪胺和0.04g NaOH(0.1M)的10mL甲醇溶液为电解液，进行电聚合酪胺，电聚合电位为0～1.5V，扫速为50mV/s，扫描15圈，取出电极，用蒸馏水冲洗干净，晾干，得到Pty/TNs修饰电极，在电极表面两侧各滴涂10μL GC‑HBAP溶液，于4℃冰箱中晾干，制得GC‑HBAP/Pty/TNs修饰电极，最后取10μL酶溶液(1.0mg/mL AChE，5.0mg/mL壳聚糖)滴涂于电极一侧，4℃晾干，制得AChE/GC‑HBAP/Pty/TNs光电化学传感器。