[发明专利]一种基于鸭胚的卵母细胞的分离提取方法在审

专利信息
申请号: 201710595281.3 申请日: 2017-07-20
公开(公告)号: CN107164316A 公开(公告)日: 2017-09-15
发明(设计)人: 罗茜;夏伟光;郑春田;陈伟;何静怡;董春琳 申请(专利权)人: 广东省农业科学院动物科学研究所
主分类号: C12N5/075 分类号: C12N5/075
代理公司: 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 代理人: 汤东凤
地址: 510640 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种基于鸭胚的卵母细胞的分离提取方法,包括以下步骤选取鸭胚的卵巢组织,将卵巢组织置于灭菌PBS中,将卵巢组织剪碎;在剪碎的卵巢组织碎片中加入混合酶消化液,将卵巢组织碎片和混合酶消化液置于细口消化瓶中,并放置在摇床上进行消化处理;用移液枪吹打卵巢组织碎片,加入胎牛血清终止消化,用细胞筛网过滤;收集滤液,并进行离心处理;弃滤液,在沉淀的细胞中加细胞培养基,用移液器轻柔吹打,使细胞悬浮,将细胞悬浮液铺板培养皿;分离提取得到基于鸭胚的卵母细胞。本发明不需要解剖成年家禽,减少细胞污染并且减少了试验成本,能够快速高效的获取卵母细胞。
搜索关键词: 一种 基于 细胞 分离 提取 方法
【主权项】:
一种基于鸭胚的卵母细胞的分离提取方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、选取鸭胚的卵巢组织4‑6个,将卵巢组织置于灭菌PBS中,将卵巢组织剪碎;步骤2、在剪碎的卵巢组织碎片中加入10ml混合酶消化液,将卵巢组织碎片和混合酶消化液置于细口消化瓶中,并放置在摇床上进行消化处理;步骤3、用移液枪吹打卵巢组织碎片,加入胎牛血清终止消化,用细胞筛网过滤;步骤4、收集滤液,并进行离心处理;弃滤液,在沉淀的细胞中加细胞培养基,移液器轻柔吹打20‑30次,使细胞悬浮,将细胞悬浮液铺板培养皿;分离提取得到基于鸭胚的卵母细胞。
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