[发明专利]一种基于鸭胚的卵母细胞的分离提取方法在审
申请号: | 201710595281.3 | 申请日: | 2017-07-20 |
公开(公告)号: | CN107164316A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 罗茜;夏伟光;郑春田;陈伟;何静怡;董春琳 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院动物科学研究所 |
主分类号: | C12N5/075 | 分类号: | C12N5/075 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 510640 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于鸭胚的卵母细胞的分离提取方法,包括以下步骤选取鸭胚的卵巢组织,将卵巢组织置于灭菌PBS中,将卵巢组织剪碎;在剪碎的卵巢组织碎片中加入混合酶消化液,将卵巢组织碎片和混合酶消化液置于细口消化瓶中,并放置在摇床上进行消化处理;用移液枪吹打卵巢组织碎片,加入胎牛血清终止消化,用细胞筛网过滤;收集滤液,并进行离心处理;弃滤液,在沉淀的细胞中加细胞培养基,用移液器轻柔吹打,使细胞悬浮,将细胞悬浮液铺板培养皿;分离提取得到基于鸭胚的卵母细胞。本发明不需要解剖成年家禽,减少细胞污染并且减少了试验成本,能够快速高效的获取卵母细胞。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 细胞 分离 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种基于鸭胚的卵母细胞的分离提取方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、选取鸭胚的卵巢组织4‑6个,将卵巢组织置于灭菌PBS中,将卵巢组织剪碎;步骤2、在剪碎的卵巢组织碎片中加入10ml混合酶消化液,将卵巢组织碎片和混合酶消化液置于细口消化瓶中,并放置在摇床上进行消化处理;步骤3、用移液枪吹打卵巢组织碎片,加入胎牛血清终止消化,用细胞筛网过滤;步骤4、收集滤液,并进行离心处理;弃滤液,在沉淀的细胞中加细胞培养基,移液器轻柔吹打20‑30次,使细胞悬浮,将细胞悬浮液铺板培养皿;分离提取得到基于鸭胚的卵母细胞。
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