[发明专利]一种高稳定性MCF‑7乳腺癌细胞的复苏方法在审
申请号: | 201710524765.9 | 申请日: | 2017-06-30 |
公开(公告)号: | CN107164328A | 公开(公告)日: | 2017-09-15 |
发明(设计)人: | 李瑞清 | 申请(专利权)人: | 太仓卡斯特姆新材料有限公司 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
代理公司: | 苏州市方略专利代理事务所(普通合伙)32267 | 代理人: | 马广旭 |
地址: | 215434 江苏省苏州市太*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明提供了一种高稳定性MCF‑7乳腺癌细胞的复苏方法,将冻存的MCF‑7乳腺癌细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出,在取出后1min内于37℃摇晃至含有MCF‑7乳腺癌细胞专用冻存液的MCF‑7乳腺癌细胞液完全融化,将MCF‑7乳腺癌细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜培养基的离心管中,用移液枪上下吹打20‑30次,于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min;移去上清液,加入1‑2ml的新鲜MCF‑7乳腺癌细胞专用培养基,用移液枪上下吹打40‑50次,然后均匀的加入到盛有7‑9ml的新鲜培养基的培养皿中,于37℃,5%CO2培养箱中培养。 | ||
搜索关键词: | 一种 稳定性 mcf 乳腺 癌细胞 复苏 方法 | ||
【主权项】:
一种高稳定性MCF‑7乳腺癌细胞的复苏方法,其特征在于:包括以下步骤:将冻存的MCF‑7乳腺癌细胞冻存管从液氮或者‑80℃冰箱中取出,在取出后1min内于37℃摇晃至含有MCF‑7乳腺癌细胞专用冻存液的MCF‑7乳腺癌细胞液完全融化,将MCF‑7乳腺癌细胞液加入到盛有2‑3ml新鲜MCF‑7乳腺癌细胞专用培养基的离心管中,用移液枪上下吹打20‑30次,于1000‑1500g/min的转速下离心3‑10min;移去上清液,加入1‑2ml的新鲜MCF‑7乳腺癌细胞专用培养基,用移液枪上下吹打40‑50次,然后均匀的加入到盛有7‑9ml的新鲜MCF‑7乳腺癌细胞专用培养基的培养皿中,于37℃,5%CO2培养箱中培养;所述MCF‑7乳腺癌细胞专用冻存液以重量组分计,包括以下组分:二甲基亚砜5‑15份、羟甲基淀粉2‑5份、山梨糖3‑12份、维生素C1‑4份、50%高渗葡萄糖0.8‑3份、丙二醇1‑1.5份、(S)‑(‑)‑1‑(4‑氟异喹啉‑5‑基)磺酰基‑2‑甲基‑1,4‑二氮环庚烷0.3‑3份和基础培养基80‑90份。
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