[发明专利]表面锚定的FC‑诱饵抗体展示系统

摘要

本发明部分提供了同时使用分泌和展示模式的抗体展示系统。与单价抗体片段复合的诱饵可以在宿主细胞表面上表达，其中所述片段可以就抗原结合进行测定，而全抗体同时从宿主细胞中分泌。还提供了使用该系统用于鉴定与目的抗原特异性结合的抗体的方法。还提供了对于制备抗体展示系统有用的多肽、多核苷酸和宿主细胞连同其使用方法。

主权项

一种用于测定抗体或其抗原结合片段是否与抗原特异性结合的方法，其包括使抗体展示系统与所述抗原接触；其中所述抗体展示系统包含：(a)分离的真核宿主细胞，其包含编码融合至轻链恒定结构域的所述抗体或抗原结合片段的免疫球蛋白轻链可变区的多核苷酸；编码包含融合至表面锚定多肽的重Fc免疫球蛋白结构域的诱饵的多核苷酸；和编码融合至Fc的所述抗体或抗原结合片段的免疫球蛋白重链可变区的多核苷酸；其中在表达每种所述多核苷酸编码的多肽的条件下培养所述宿主细胞；(b)包含融合至所述真核宿主细胞表面上的表面锚定多肽或其功能片段的Fc免疫球蛋白结构域或其功能片段的诱饵；和(c)与宿主细胞表面上的所述诱饵的Fc部分复合的，包含所述免疫球蛋白重链和免疫球蛋白轻链的Fc/抗原结合片段；并且测定所述Fc/抗原结合片段是否与所述抗原特异性结合；其中所述编码诱饵的多核苷酸与可调节的启动子可操作地结合，所述可调节的启动子可被抑制以抑制诱饵表达；其中如果与宿主细胞表面上的所述诱饵的Fc部分复合的，包含所述免疫球蛋白重链和免疫球蛋白轻链的Fc/抗原结合片段与所述抗原特异性结合，则所述抗体或抗原结合片段被测定为特异性结合所述抗原。