[发明专利]酶活性提高的β-甘露聚糖酶突变体及其编码基因和应用有效
申请号: | 201710508365.9 | 申请日: | 2017-06-28 |
公开(公告)号: | CN107083374B | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 肖志壮;崔巍;张稳;薛海曌;方安然 | 申请(专利权)人: | 青岛红樱桃生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;A23K20/189 |
代理公司: | 37264 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 王晓晓<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 266001 山东省青岛市高新区*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明提供了酶活性提高的β‑甘露聚糖酶突变体及其编码基因和应用。本发明以能够在巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris中进行高效表达的β‑甘露聚糖酶为基础,使用易错PCR方法对该酶基因进行突变,再通过高通量筛选方法挑选出正突变,经过两轮易错PCR,最终获得4个酶活显著提高的突变体,分别为MAN‑M01、MAN‑M02、MAN‑M03和MAN‑M04,其酶活与原始β‑甘露聚糖酶相比,酶活分别提高了40%、58%、80%和64%,本发明获得了酶活性大大提高的β‑甘露聚糖酶,有利于实现其在商业中的应用,从而降低生产成本。 | ||
搜索关键词: | 甘露聚糖酶 酶活 易错PCR 酶活性 突变体 突变 巴斯德毕赤酵母 高通量筛选 编码基因 高效表达 酶基因 应用 | ||
【主权项】:
1.β-甘露聚糖酶突变体MAN-M01,其特征在于,所述的β-甘露聚糖酶突变体MAN-M01的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示,所述的突变体MAN-M01由氨基酸序列为SEQ ID NO:1的β-甘露聚糖酶的第306位氨基酸由丝氨酸变为脯氨酸获得。/n
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