[发明专利]一种金花茶组培繁育方法

摘要

本发明公开了一种金花茶组培繁育方法，包括以下步骤1)外植体的选择及消毒选取金花茶种子作为外植体消毒后备用；2)金花茶提取液的制备取金花茶叶片加水煮沸得金花茶提取液；3)初代诱导培养将种子，接种到初代诱导培养基上培养8‑12天，直至所述种子长出顶芽；4)继代增殖培养将顶芽接种到继代增殖培养基上培养16‑20天，诱导顶芽增殖，得丛生芽；5)生根培养待丛生芽的单芽长至3.0～5.0cm时，将金花茶组培苗接种到生根培养基中进行诱导生根培养22～26天；6)试管苗的驯化和移栽。该方法不受季节影响，培育时间短，繁殖速率快，解决了目前金花茶种质资源稀少，结果率低等问题，实现了金花茶良种低成本大规模繁育。

主权项

一种金花茶组培繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体的选择及消毒：选取健康无病的金花茶种子作为外植体，先将种子经流水冲洗2‑4min后，在超净工作台上用体积百分数为75％的乙醇溶液表面灭菌1‑3min，无菌水冲洗3次，质量百分数为0.1％的HgCl2溶液灭菌4‑6min，无菌水冲洗4次；(2)金花茶提取液的制备：取适量新鲜嫩绿的金花茶叶片加入到开放的提取罐中，加入水加热到煮沸状态煎煮40‑60min，叶片与水的料液体积比为1:2‑4，之后倒出提取液至液体存储罐中；再向提取罐中加入水加热到煮沸状态煎煮1‑2h，且叶片与水的料液体积比为1:3‑5，倒出提取液至所述液体存储罐中，最后浓缩液体存储罐中的提取液至原体积的1/5‑1/3，得金花茶提取液；(3)初代诱导培养：把步骤(1)经消毒的种子，接种到初代诱导培养基上，在无菌条件下，培养8‑12天，直至所述种子长出顶芽；初代诱导培养基为1/2MS基本培养基+金花茶提取液0.8～1.2g/L+6‑BA 0.4～0.8mg/L+NAA 0.2～0.6mg/L+蔗糖20～30g/L+营养液4.0～8.0g/L；(4)继代增殖培养：将所述顶芽接种到继代增殖培养基上培养16‑20天，诱导顶芽增殖，得丛生芽；增殖培养基为1/2B5基本培养基+金花茶提取液0.8～1.2g/L+6‑BA 0.4～0.6mg/L+NAA 0.3～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L+琼脂4.0～6.0g/L；(5)生根培养：待所述丛生芽的单芽长至3.0～5.0cm时，将金花茶组培苗接种到生根培养基中进行诱导生根培养22～26天；生根培养基为DCR培养基+金花茶提取液1.0～1.6g/L+IBA 0.6～0.8mg/L+NAA 0.4～0.6mg/L+蔗糖15～25g/L+琼脂6.0～8.0g/L；(6)试管苗的驯化和移栽：将金花茶生根试管苗从培养室移至塑料大棚放置4～6天后，去瓶盖炼苗2～4天，取出金花茶幼苗，将其根部用0.1％多菌灵处理1～2min后，移栽至穴盘中的栽培基质内，覆膜保湿3～5天，其间上午及下午各通风透气一次，每次20～30min，遮荫65‑75％，揭膜后喷施600‑800倍液的甲基托布津，且按照10g/m2的用量进行喷施，此后进行正常的栽培管理，即可。