[发明专利]含喜树碱植物水培根系化感物质的分离富集方法

摘要

本发明公开了一种含喜树碱植物水培根系化感物质的分离富集和检测方法。首先以硅胶作填充剂填充固相萃取柱对植物水培液进行萃取吸附根系代谢物，然后取出填充硅胶加到硅胶层析柱上层进行柱层析分离，再以石油醚、乙酸乙酯、乙醇、氯仿作洗脱剂，以不同组合配比进行洗脱，按洗脱液组分收集洗脱液，旋蒸浓缩，利用气质联用（GC‑MS）技术对分离组分进行分析。本发明实现了两种植物水培根系分泌物中化感物质的大量分离富集和检测。结果从喜树水培根系和蛇根草水培根系分泌物中共分离得到25种化感物质。本发明对探明更多的水培体系中的化感物质具有非常重要的技术指导作用，基于本发明将可以实现对化感物质中有自毒作用的物质及时进行清除，保证植物的生长不会被抑制，促使植物旺盛生长，对优化植物水培体系具有重要意义。

主权项

一种含喜树碱植物水培根系化感物质的分离富集方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.将收集的水培液除去杂质，以硅胶作为填充料，利用SPE固相萃取，富集水培液至吸附平衡，富集完毕后收集含根系分泌物的硅胶，烘干得含浓缩粗品的硅胶粉；S2.取经烘干前处理的硅胶，加入石油醚，匀浆法装柱，用石油醚冲洗层析柱；S3.取步骤S1所得含浓缩粗品的硅胶粉，用石油醚稀释混匀，加入步骤S2准备的层析柱中，重复上述操作使柱体充分密实，然后在样品硅胶上加柱层析硅胶；S4.配制不同比例的洗脱液进行梯度洗脱，流出液分段收集；其中，步骤S1所述水培液分别是喜树水培的分泌液或蛇根草水培的分泌液；步骤S4所述的洗脱液，喜树水培的分泌液所用的洗脱液为石油醚、乙酸乙酯、乙醇的混合物；蛇根草水培的分泌液所用的洗脱液为石油醚、乙醇、乙酸乙酯和氯仿的混合物。