[发明专利]降低含人工合成抗菌药水体中生物毒性的方法

摘要

本发明公开了一种降低含人工合成抗菌药水体中生物毒性的方法，包括如下步骤：(1)种子培养：将黄孢原毛平革菌培养得一级种子；将血红密孔菌培养得一级种子；(2)将含人工合成抗菌药的水体与发酵培养基混合配成降解液；(3)取黄孢原毛平革菌和血红密孔菌一级种子离心，弃上清，放入降解液中，发酵，离心，收集上清；(4)将步骤(3)得上清与Luria‑Bertani培养基混合，接入大肠杆菌和枯草芽孢杆菌，监测大肠杆菌和枯草芽孢杆菌在24h内OD600变化，OD600与含人工合成抗菌药水体中生物毒性成反比。本发明的方法用黄孢原毛平革菌和血红密孔菌混合培养降解含人工合成抗菌药水体，降低该水体生物毒性的效果好。

主权项

降低含人工合成抗菌药水体中生物毒性的方法，其特征包括如下步骤：(1)种子培养：将保藏编号为CGMCC 5.776的黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)在马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基中，在28‑35℃培养4‑6天；再转入马铃薯葡萄糖琼脂液体培养基中在28‑35℃，在搅拌下，培养45‑50小时，得到黄孢原毛平革菌一级种子；将保藏编号为CGMCC 5.815的血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus)在马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基中，在28‑35℃培养5‑7天；再转入马铃薯葡萄糖琼脂液体培养基中在28‑35℃，在搅拌下，培养45‑50小时，得到血红密孔菌一级种子；(2)降解液配制：将含人工合成抗菌药的水体与发酵培养基混合配成降解液，使降解液中人工合成抗菌药的浓度在2‑10mg/L；(3)按比例，取步骤(1)获得的黄孢原毛平革菌的一级种子15‑25mL干重条件下的浓度为0.09‑0.15g/L和血红密孔菌的一级种子15‑25mL干重条件下的浓度为0.09‑0.15g/L，在6000‑8000rpm离心10‑15min，弃上清，放入降解液中，使总体积为500mL，在28‑35℃，150‑200rpm，混合发酵180‑200h，6000‑8000rpm离心，收集上清；(4)将步骤(3)获得的上清与Luria‑Bertani培养基按4:1比例混合，接入大肠杆菌(E.coli DH5α)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis RH33)，使所述大肠杆菌的初始光密度OD600＝0.2，使所述枯草芽孢杆菌初始光密度OD600＝0.2，监测所述大肠杆菌和枯草芽孢杆菌在24h内OD600变化，OD600与含人工合成抗菌药水体中生物毒性成反比。