[发明专利]基于磷酸化肽段筛选的标记蛋白评价羊肉品质的方法

摘要

本发明公开了一种基于磷酸化肽段筛选的标记蛋白评价羊肉品质的方法，该方法凭借生物质谱技术对高、低品质羊肉中肽段的磷酸化水平进行定量和定性，并对定性后的磷酸化蛋白进行GO和KEGG富集分析，通过蛋白质生物信息分析磷酸化蛋白与羊肉品质的潜在关系，将蛋白质磷酸化水平在高、低品质羊肉中具有明显差异的磷酸化蛋白作为标记蛋白，从而根据羊肉中标记蛋白的含量判断羊肉品质的优劣。本发明首次鉴定了羊肉中磷酸化蛋白，为筛选反映羊肉品质的标记蛋白提供了依据，而且可以依据蛋白质磷酸化水平结果判定羊肉品质，提供了一种新的品质评价方法，有利于为肉品企业创造更多的利润，实现优质优价，应用前景广阔。

主权项

1.一种基于磷酸化肽段筛选的标记蛋白评价羊肉品质的方法，其特征在于由以下步骤组成：（1）采集宰后12小时的高品质羊肉和低品质羊肉样品；（2）提取步骤（1）采集样品中的磷酸化蛋白，并将获得的磷酸化蛋白酶解，获得磷酸化肽段；（3）采用生物质谱对步骤（2）获得的磷酸化肽段进行定性和定量检测，以定性后的磷酸化肽段在高品质羊肉中的相对定量值与低品质羊肉中的相对定量值之比的对数值作为判断肽段磷酸化水平变化的依据，即该对数值大于1则磷酸化水平上调，该对数值小于‑1则磷酸化水平下调，该对数值处于1和‑1之间则该磷酸化肽段在高品质羊肉和低品质羊肉样品中的磷酸化水平无显著变化；（4）对步骤（3）定性后的磷酸化肽段对应的磷酸化蛋白进行GO富集和磷酸化蛋白KEGG通路分析；（5）根据步骤（4）的分析结果并结合蛋白质相互作用网络，将高品质羊肉样品和低品质羊肉样品中含量差异显著的磷酸化蛋白作为标记蛋白；（6）检测不同待测羊肉样品中标记蛋白的含量，根据标记蛋白的含量判断不同羊肉之间的品质高低：如果标记蛋白为高品质羊肉标记蛋白，则标记蛋白含量越高说明待测羊肉样品品质越好；如果标记蛋白为低品质羊肉标记蛋白，则标记蛋白含量越高说明待测羊肉样品品质越差。