[发明专利]一种标记存活的革兰氏阳性细菌及其细胞壁的方法有效
申请号: | 201710321663.7 | 申请日: | 2017-05-09 |
公开(公告)号: | CN108865918B | 公开(公告)日: | 2022-01-07 |
发明(设计)人: | 李学兵;丁超;孙欢 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N11/089;C12Q1/04 |
代理公司: | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人: | 朱学珺;董世豪 |
地址: | 100101 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种对存活的革兰氏阳性细菌的细胞壁进行标记的方法。所述方法通过生物正交反应,利用细菌自身的代谢途径将叠氮修饰的全乙酰化N‑乙酰葡糖胺‑1‑磷酸掺入细胞壁肽聚糖中,随后通过点击化学反应,将可检测标记物偶联至肽聚糖,从而实现对细菌肽聚糖的标记。所述方法具有普适性,可用于快速、便捷地标记革兰氏阳性细菌。 | ||
搜索关键词: | 一种 标记 存活 革兰氏 阳性 细菌 及其 细胞壁 方法 | ||
【主权项】:
1.一种对存活的革兰氏阳性细菌进行标记的方法,所述方法包括如下步骤:(i)在革兰氏阳性细菌培养基中添加叠氮修饰的全乙酰化N‑乙酰葡糖胺‑1‑磷酸,将革兰氏阳性细菌接种入所述培养基中并对所述革兰氏阳性细菌进行培养,得到细菌培养物;(ii)收集步骤(i)得到的所述细菌培养物,通过处理得到所述细菌培养物的沉淀物;(iii)对步骤(ii)获得的所述沉淀物中的细菌进行固定;(iv)向步骤(iii)的经固定的细菌中添加连接有炔基或三芳基膦的可检测标记物,从而将所述标记物偶联至所述细菌内的肽聚糖;(v)对所述可检测标记物进行检测。
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