[发明专利]一种日本囊对虾育种群体抗高氨氮与生长性状的选育方法

摘要

一种日本囊对虾育种群体抗高氨氮与生长性状的选育方法，包括如下步骤：(1)亲虾引进、(2)家系建立、(3)抗高氨氮预实验、(4)选育家系的抗高氨氮实验、(5)抗高氨氮数据记录、(6)遗传评估模型建立、(7)家系留种、(8)第二代家系建立。本发明可选育出一种抗高氨氮与生长优势的日本囊对虾新品种，增强日本囊对虾对氨氮浓度的抗逆性，提升日本囊对虾的成活率和生长速度。

主权项

一种日本囊对虾育种群体抗高氨氮与生长性状的选育方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)亲虾引进：收集日本囊对虾的野生群体多尾，平均分配至多个养育池中进行培育，并使用营养物质促进虾的性腺成熟；(2)家系建立：待亲虾成熟稳定后摘除单侧眼柄，每天晚上挑选性腺饱满连续、发育成熟的亲虾到产卵桶内产卵,1尾亲虾放1个产卵桶，所产后代为1个全同胞家系，次日将未产卵亲虾放回原养育池中，已产卵亲虾放回其他养育池中；待卵孵化后，收集无节幼体，消毒后转移到科研车间育苗桶内开始单独培育虾苗，10天内按此过程共建立家系100个并依次编号，育苗过程中淘汰部分家系；所有家系均经过单独培育，家系之间严格避免相互混杂；(3)抗高氨氮预实验：采用急剧攻毒实验，试验液为NH4Cl溶于养殖海水制得，设置高氨氮浓度梯度和1个对照组，高氨氮浓度梯度分别为4、8、16、32、64和128mg/L,每组设置1个平行组，统计攻毒48h后存活个体数，依照线性回归法计算半致死浓度；(4)选育家系的抗高氨氮实验：抗高氨氮实验在养育池进行，加海水若干，调配海水NH4Cl浓度为所计算的半致死浓度，每个家系随机挑选个体30尾装入网框内，1个家系3个重复组，每个网框做好标记，按照编号统一放置在养育池中，实验过程中不投料，每隔一段时间检查一次，统计死亡个体数，测量已死亡个体的生长性状；(5)抗高氨氮数据记录：记录个体的表型数据,并按家系顺序排列，所有个体生长性状与抗逆性状一一对应，为模型设定1个遗传组，父母本都纳入遗传组中，按照方差组分和遗传参数估计所使用软件的要求,对数据进行整理和排列；其中，存活性状为二项分布的分类变量，以二进制数据来表示个体的存活状态，1为存活，0为死亡，按照广义线性模型建模型并统计家系存活率；(6)遗传评估模型建立：建立多性状线性动物模型,对于每一个体生长性状的观察值y均可剖分为:yijk＝u+Hi+bdj+ak+eijk其中i,j,k分别表示池号、日龄号、个体编号,yijk为性状观测值，u为总体平均值,Hi为固定效应,dj为日龄协变量，b为回归系数，ak为个体随机效应，eijk为随机残差效应；体长、腹长与体重的遗传力计算公式为:h2=σa2σa2+σe2]]>式中σa2为加性遗传方差组份，σe2为随机方差组份。抗逆性实验结束后,统计所有实验个体的存活情况,得到各家系存活率,应用阈模型和广义线性混合模型方法估计存活性状的方差组份,育种分析模型为公母畜模型：Pr(yijkls=1)=Pr(Lijkls>0)=eu+Hi+bdj+sk+dl1+eu+Hi+bdj+sk+dl]]>式中，yijkls为第S个体的存活状态，(1为存活，0为死亡)，Lijkls为潜在变量，如果Lijkls>0，那么yijkls＝1，如果yijkls≤0，那么yijks＝0，u为总体平均值，Hi为固定效应,dj为日龄协变量，b为回归系数，sk为第k个父本加性遗传效应,dl为第l个母本加性遗传效应；存活性状遗传力计算公式：式中，σsd2为公母畜方差组份均值，σe2为残差方差组份，广义线性混合模型使用的非线性连接函数为Logistic，logistic分布值为在迭代REML过程中，保证达到整体的最大化，收敛标准为两次迭代所得估计值的方差小于10‑6；利用软件模型估计体长、腹长、体重的遗传相关与表型相关系数，利用多性状阈模型估计生长性状与抗高氨氮性状的遗传相关与表型相关参数，所建家系均为全同胞家系；(7)家系留种：利用遗传评估软件计算家系的平均抗逆性状与生长性状的育种值，按照抗高氨氮性状与生长性状1:1进行加权得到所有家系的综合育种值；根据综合育种值排序，保留排名靠前的10个家系，其余家系淘汰，对保留的家系继续养殖到亲虾规格；(8)第二代家系建立：对保留家系每个家系挑选20‑50尾亲虾到养育池暂养让其自然交配，对亲虾的眼柄环进行标记，不同家系的眼柄环附带不同标记以便识别，避免出现近亲交配，以此建立第二代家系100个，按标准化育苗、养殖、抗高氨氮与生长的选育流程直到选育有明显抗高氨氮与生长优势的新品种。