[发明专利]检测人血浆中匹伐他汀的液相色谱-串联质谱方法

摘要

本发明涉及检测人血浆中匹伐他汀的液相色谱‑串联质谱方法。本发明提供了检测血浆中匹伐他汀浓度的方法，通过LC‑MS/MS对血浆中匹伐他汀浓度进行分析。本发明方法优选采用蛋白沉淀预处理方法，以氘代匹伐他汀为内标，采用Eclipse Plus Phenyl‑Hexyl柱等度洗脱，电喷雾电离源(ESI)串联质谱检测。使本发明方法的血浆样本提取回收率大于93％，未受基质效应影响，预处理前采用统计匹伐他汀浓度RSD％考察匹伐他汀稳定性，保证测定数据的准确性，其专一性选择性强、灵敏度高、检测快速、用量小，满足简单、可靠、高通量、条件可控的临床大批量样品分析需求。本发明方法的特异性、稳定性等均进行了验证，已成功用于评价匹伐他汀各剂型的生物等效性。

主权项

1.检测人血浆中匹伐他汀的液相色谱-串联质谱方法，其特征在于包括下述步骤：/n预处理，融化血浆，加入内标d₄-匹伐他汀，加入乙腈沉淀蛋白，涡流及离心后取上清液为待测样品；/n色谱，将待测样品液相色谱分离，采用Eclipse Plus Phenyl-Hexyl柱，等度洗脱，流动相A:流动相B体积比为65:35，流速0.5μL/min，柱温40℃，进样量2.0μL，流动相A为2mM醋酸铵水溶液，流动相B为乙腈；/n质谱，采用电喷雾电离源离子源，正离子多反应监测扫描，喷雾电压5000V，内源气体160psi，气体270psi，气帘气体40psi，离子源温度500℃，匹伐他汀反应监测离子[M+H]+m/z422→m/z 290，CE 37eV，d₄-匹伐他汀反应监测离子[M+H]+m/z 426→m/z 294，CE 37eV，内源气体1、气体2和气帘气体均为N2；/n计算，以匹伐他汀浓度为横坐标，匹伐他汀与内标d₄-匹伐他汀的峰面积比为纵坐标，回归制得相应标准曲线方程，计算匹伐他汀的血药浓度。/n