[发明专利]一种从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法

摘要

本发明公开了一种从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法，步骤如下：取新鲜马血，加入混合缓冲提取液，搅拌混合15‑20min，获得第一混合液；将第一混合液静置12‑24小时，获得第二混合液；将第二混合液匀浆8‑12min，获得第三混合液；将第三混合液离心23‑28min，取上清液，获得第四混合液；采用Procainamide亲和层析法对第四混合液进行纯化处理，获得初次纯化物；采用SephadexG‑200凝胶柱对初次纯化物进行纯化处理，获得最终纯化物；将最终纯化物浓缩，干燥，即得产品。本发明提取方法所获得的乙酰胆碱酯酶的酶活性高，纯度高，灵敏度高的优点，且所制得的产品为粉末状，易于存储，具有广阔的市场前景。

主权项

一种从马血中提取乙酰胆碱酯酶的方法，其特征在于，步骤如下：1)取新鲜马血，加入混合缓冲提取液，在4℃冰浴、100‑200rpm的转速下搅拌混合15‑20min，获得第一混合液；2)将第一混合液在0‑4℃下静置12‑24小时，获得第二混合液；3)将第二混合液在4℃冰浴、300‑400rpm的转速下匀浆8‑12min，获得第三混合液；4)将第三混合液在4℃、7500‑8000rpm的条件下冷冻离心23‑28min，取上清液，获得第四混合液；5)采用Procainamide亲和层析法对第四混合液进行纯化处理，获得初次纯化物；6)采用SephadexG‑200凝胶柱对初次纯化物进行纯化处理，获得最终纯化物；7)将最终纯化物浓缩，干燥，即得产品。