[发明专利]过表达靶蛋白的系统和方法在审
申请号: | 201710207100.5 | 申请日: | 2017-03-31 |
公开(公告)号: | CN108660155A | 公开(公告)日: | 2018-10-16 |
发明(设计)人: | 胡育诚;沈志哲 | 申请(专利权)人: | 胡育诚 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10 |
代理公司: | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人: | 徐金国 |
地址: | 中国台湾新*** | 国省代码: | 中国台湾;71 |
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摘要: | 本发明提供一种过表达靶蛋白的系统,所述系统包含二氢叶酸还原酶缺陷型CHO细胞、叶酸拮抗剂、靶蛋白表达载体和CRISPRi表达载体,其中靶蛋白表达载体包含靶蛋白表达盒和DHFR表达盒,CRISPRi表达载体包含gRNA盒和dCas9表达盒。所述过表达靶蛋白的系统可以显著提高靶蛋白的产量,并缩短进行基因扩增的时间。 | ||
搜索关键词: | 靶蛋白 表达载体 表达盒 二氢叶酸还原酶缺陷型 叶酸拮抗剂 基因扩增 | ||
【主权项】:
1.一种过表达靶蛋白的系统,其特征在于,包含:二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)缺陷型CHO细胞;叶酸拮抗剂;靶蛋白表达载体,所述靶蛋白表达载体包含:靶蛋白表达盒,所述靶蛋白表达盒包含第一启动子和靶蛋白的基因;和DHFR表达盒,所述DHFR表达盒包含第二启动子和DHRF基因;以及CRISPRi表达载体,所述CRISPRi表达载体包含:gRNA盒,所述gRNA盒包含第三启动子、gRNA序列和终止子;和dCas9表达盒,所述dCas9表达盒包含第四启动子、dCas9‑KRAB基因和抗生素耐受基因。
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