[发明专利]一种烟薯25号组培脱毒苗的生产及驯化移栽方法

摘要

本发明是一种烟薯25号组培脱毒苗的生产及驯化移栽方法，具体步骤为烟薯25号组培脱毒苗的获取；包括催芽和茎尖剥取与培养；烟薯25号组培脱毒苗的驯化和移栽继代培养1个月的脱毒苗，逐渐打开瓶口驯化，直至最后瓶口打开一半；洗去附着在根部的培养基，分单株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株间距30cm；脱毒试管苗栽植后，大水浇透，保持塑料大棚中的空气湿度；移栽后的前2周，上午搭遮荫网，防止太阳直晒；2周后撤掉遮荫网，中午放风，浇水；移栽3周后撒施尿素随即浇水，施肥量按7g·m‑2。本发明将脱毒试管苗直接移栽于塑料大棚中，减少了操作程序，不需要经过驯化室驯化的过程，降低脱毒苗的生产成本。

主权项

一种烟薯25号组培脱毒苗的生产及驯化移栽方法，其特征在于，具体步骤为：(1)烟薯25号组培脱毒苗的获取催芽：秋天甘薯收获后，选用无虫蛀、无损伤的薯块，在太阳底下暴晒4天，用清水洗净，在薯块上覆盖3cm的沙子，放入36℃培养箱中催芽；茎尖剥取与培养：当芽苗长至15cm时，取顶端1‑2cm，减去肉眼可见的叶片，先用清水冲洗，然后在超净工作台内用70％酒精浸泡15s，再用0.1％升汞溶液浸泡6min进行表面消毒，最后用无菌水漂洗6‑10次；在体视解剖镜下剥取带有l‑2个叶原基的茎尖，接种到添加0.2mg·L‑1NAA和2.0mg·L‑1BAP的MS培养基上进行培养，诱导不定芽形成；当不定芽长到2cm时，从基部切下，转移到不添加生长调节剂的MS培养基上培养，使其长成完整植株；采用ELISA病毒检测试剂盒进行病毒检测，摘取经病毒检测脱除病毒的无毒苗的1‑2个叶节作为一个切段，扦插入新的MS培养基中，扩大繁殖；培养温度为26℃，采用13h·d‑1的光照，光照强度为30μmol·m‑2·s‑1；(2)烟薯25号组培脱毒苗的驯化和移栽继代培养1个月的脱毒苗，逐渐打开瓶口驯化，直至最后瓶口打开一半；洗去附着在根部的培养基，分单株直接栽植于塑料大棚的土壤中，株间距30cm；脱毒试管苗栽植后，大水浇透，保持塑料大棚中的空气湿度；移栽后的前2周，上午搭遮荫网，防止太阳直晒；2周后撤掉遮荫网，中午放风，浇水；移栽3周后撒施尿素随即浇水，施肥量按7g·m‑2。