[发明专利]一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法

摘要

本发明公开了一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法，包括以下步骤取畜禽养殖废水，调节pH值至3‑4；用玻璃纤维滤膜过滤得到滤液；将滤液通过活化后的固相萃取柱，然后对固相萃取柱用超纯水淋洗后进行真空干燥处理；用体积比为0.5‑3 100的甲酸与甲醇混合溶液洗脱固相萃取柱，收集洗脱液；将洗脱液浓缩，得到浓缩液；将浓缩液用二甲基亚砜定容，将定容后的溶液用滤膜过滤，并将得到的滤液灭菌，得到灭菌样品；取灭菌样品，使用无激素胎牛血清的无酚红培养基进行梯度稀释，得到一系列不同浓度的稀释样品；将稀释样品进行细胞毒性实验。

主权项

一种畜禽养殖废水中抗生素联合毒性效应的分析方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取畜禽养殖废水，加入磷酸，调节pH值至3‑4；（2）将步骤（1）处理的水样，用玻璃纤维滤膜过滤得到滤液；（3）将滤液通过活化后的HLB固相萃取柱，然后对HLB固相萃取柱用超纯水淋洗后进行真空干燥处理；（4）用体积比为0.5‑3 ：100的甲酸与甲醇混合溶液洗脱HLB固相萃取柱，收集洗脱液；（5）将洗脱液浓缩，得到浓缩液；（6）将浓缩液用二甲基亚砜定容，将定容后的溶液用孔径为0.1‑0.5微米的滤膜过滤，并将得到的滤液灭菌，得到灭菌样品；（7）取灭菌样品，使用无激素胎牛血清的无酚红培养基进行梯度稀释，得到一系列不同浓度的稀释样品；（8）将处于对数生长期的HepG2细胞用于药物刺激实验，待细胞贴壁后，将稀释样品对细胞进行暴露，通过CCK‑8试剂盒对细胞活性进行检测，根据细胞活性的大小来表征抗生素联合毒性效应。