[发明专利]一种观察水稻根尖微管横纹排列方式的方法

摘要

本发明公开了一种观察水稻根尖微管横纹排列方式的方法，包括以下步骤：1）将样品使用4wt%的多聚甲醛固定液固定，放入PBS中浸泡3‑5min；2）将步骤1）浸泡后的样品取出、制成标样；3）将步骤2）所得样品用PBS浸泡；然后使用tubulin一抗避光孵育；4）将步骤3）的样品取出，用PBS浸泡，然后使用标记荧光的二抗避光孵育；5)将步骤4）避光处理的样品用PBS浸泡3‑5min、将样品置于载玻片上，使用荧光抗淬灭封片剂封片，Confocal观察并拍照。本发明所提供的观察方法方便、快捷、省时，简便，可以在6‑7小时内即可利用激光共聚焦显微镜看到根尖微管的排列情况。

主权项

1.一种观察水稻根尖微管横纹排列方式的方法，其特征在于，由以下步骤组成：/n1）将样品仅使用4wt%的多聚甲醛固定液固定20-40min，放入PBS中浸泡3-5min；/n2）将步骤1）浸泡后的样品取出、制成标样，将所述标样用封闭液室温封闭50-60min，所述标样的封闭方法为将标样放到装有封闭液的离心管中并保证完全覆盖；/n3）将步骤2）所得样品取出、用PBS浸泡3-5min，更换PBS浸泡液，重复浸泡3-5次，3-5min/次；然后使用tubulin一抗35-40℃避光孵育1-3hrs；/n4）将步骤3）避光处理的样品取出，用PBS浸泡3-5min，更换PBS浸泡液，重复浸泡3-5次，3-5min/次；然后使用标记荧光的二抗35-40℃避光孵育1-3hrs；/n5)将步骤4）避光处理的样品取出，用PBS浸泡3-5min、取出，将样品置于载玻片上，使用荧光抗淬灭封片剂封片，激光共聚焦显微镜观察并拍照。/n