[发明专利]一种光动力疗法辅助手术治疗小鼠乳腺癌细胞的试验方法

摘要

一种光动力疗法辅助手术治疗小鼠乳腺癌细胞的试验方法，步骤如下荧光纳米粒子溶液的制备；小鼠乳腺癌细胞培养；实验方法是将六周龄小鼠进行腋下接种小鼠乳腺癌细胞；2周后，将小鼠分为对照组、单纯手术切除组、单纯光动力组和手术切除联合光动力组；手术联合光动力杀伤残余肿瘤术前12小时将制备好的荧光纳米粒子溶液尾静脉注射入各组小鼠体内，然后利用白光进行照射15分钟，然后分别进行肿瘤大小的监控；在确定实验组肿瘤消失之后，各组小鼠背部再次接种同种肿瘤细胞，继续监测后续接种的肿瘤发展。本发明的优点是该方法联合具有聚集诱导发光性质的光敏剂和手术切除，解决了传统方法不能根除的局限、治疗慢、术后复发的缺点。

主权项

一种光动力疗法辅助手术治疗小鼠乳腺癌细胞的试验方法，步骤如下：（1）荧光纳米粒子溶液的制备将聚乙二醇4毫克和具有聚集诱导发光性质的光敏剂TPE‑DCM1毫克溶于1毫升四氢呋喃(THF)中，在超声破碎仪中将这1毫升溶液缓慢逐滴地加入9毫升的超纯水中制成10毫升纳米溶液体系，之后将溶液中的四氢呋喃(THF)吹掉，得到澄清的荧光纳米粒子溶液；（2）小鼠乳腺癌细胞培养将处于对数生长期的肿瘤细胞经胰酶消化后，用pH为7.4的磷酸缓冲盐溶液洗涤一次，用无血清的培养基重悬细胞；在37℃、含5％的二氧化碳的一个潮湿的环境中，将小鼠乳腺癌细胞培养在含有10％胎牛血清、1％青霉素、1％链霉素的DMEM培养基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)中。（3）实验方法1)接种将六周龄小鼠进行腋下接种小鼠乳腺癌细胞(LUC‑4T1)，每只接种50万细胞，当肿瘤达到200–400mm3，小鼠被用于活体成像研究；2)分组2周后，将小鼠分为4组，分别为对照组、单纯手术切除组、单纯光动力组和手术切除联合光动力组，每组5只；3)手术联合光动力杀伤残余肿瘤术前12小时将制备好的荧光纳米粒子溶液尾静脉注射入各组小鼠体内，各组小鼠体的实施方法是：假手术对照组，暴露肿瘤之后不手术，不光照；单纯手术组，只手术切除3/4的肿瘤组织；单纯光动力组，暴露肿瘤之后不手术，直接光照15分钟；手术联合光动力组，手术切除3/4的肿瘤组织；然后利用白光进行照射15分钟，然后分别进行肿瘤大小的监控；4)背部再次接种同种肿瘤细胞在确定实验组肿瘤消失之后，各组小鼠背部再次接种同种肿瘤细胞，继续监测后续接种的肿瘤发展。