[发明专利]基于再生液优化的表面等离子共振技术同时检测食品中多种农兽药残留的方法

摘要

本发明公开了一种基于再生液优化的表面等离子共振技术同时检测食品中多种农兽药残留的方法，包括传感芯片表面固定、标准溶液配制、测试再生液洗脱能力、建立标准工作曲线、定量检测和传感芯片再生，实现了对同一样品中多种农兽药残留组分的含量进行同时检测。本发明的优势在于利用抗原抗体结合强度和再生液洗脱能力的差异，高效实现了食品中多种农兽药残留的高灵敏、同时检测，特别适用于小分子量物质的检测，相比现有技术，缩短了多种农兽药残留的检测时间，降低了检测成本，提高了食品安全检测效率，促进了表面等离子体共振传感器在食品安全检测领域的推广应用。

主权项

一种基于再生液优化的表面等离子共振技术同时检测食品中多种农兽药残留的方法，其特征在于包括下述步骤：(1)传感芯片表面包被原或抗体的固定：将各农兽药残留组分的包被原或抗体混合至混合液的体积为50‑150μL，所述各包被原或抗体在所述混合液中的浓度均为5‑20μg/mL，再利用活化酯法将所述混合液固定在所述传感芯片表面；(2)标准溶液配制：用0.01‑0.1mol/L、pH范围为6‑8的羟乙基哌嗪乙硫磺酸盐缓冲液配置各农兽药残留组分的标准样品储备液，所述标准样品储备液的浓度均为0.1‑1mg/mL；量取所述标准样品储备液，配制其相应的标准原液；用羟乙基哌嗪乙硫磺酸盐缓冲液将所述标准原液配制成不同浓度的标准溶液，取不同浓度待测残留组分的标准溶液与过量的固定浓度的相应抗体或包被原混合孵化，得到不同浓度的待测物混合液；(3)测试再生液洗脱能力：测试HCl溶液、NaOH溶液、氯化镁溶液以及甘氨酸‑盐酸溶液对于步骤(1)得到的传感芯片表面各残留组分抗体的洗脱情况；(4)建立标准工作曲线：单组分的检测：通入50‑100μL步骤(2)制备的不同浓度的所述待测物混合液，记录表面等离子体共振传感器的响应信号变化，绘制标准工作曲线，并进行多项式曲线拟合，获得单组分回归曲线的方程；再依次测得其它残留组分的标准工作曲线及单组分回归曲线的方程；多组分检测：将多种步骤(2)制备的标准溶液与过量的抗体或包被原混合孵化，取孵化后的混合液50‑100μL，进样，记录下总体的响应信号变化，然后按照步骤(3)的测试结果，依再生液洗脱能力由弱到强的顺序依次进样洗脱，记录响应值变化；根据不同浓度孵化后的混合液及其相应再生后残留抗体或包被原的响应值绘制标准工作曲线并拟合，获得多组分回归曲线的方程；(5)定量检测：对于未知含量的含多种残留组分的未知样品进行同时检测，向所述未知样品的待测液中分别加入过量的抗体或包被原，混合孵化后进样，记录总体的响应值变化；按照再生液洗脱能力由弱到强的顺序依次进样洗脱，记录芯片表面每次残留抗体或包被原的响应值变化；将残留抗体或包被原的响应值代入步骤(4)得到的多组分检测的标准工作曲线以及相应的单组分检测标准工作曲线，计算各残留组分的浓度值；(6)通入0.01‑0.02mol/L、pH值为1.2‑2.5的甘氨酸‑盐酸缓冲溶液使芯片再生，再生后的芯片用于后续检测。