[发明专利]来源于人类干细胞的肝细胞分化方法及肝细胞在审

专利信息
申请号: 201710066109.9 申请日: 2017-02-06
公开(公告)号: CN107916248A 公开(公告)日: 2018-04-17
发明(设计)人: 韩忠成;金宗现;禹东勋 申请(专利权)人: 尼希尔株式会社
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071;C12N5/0735;C12N5/074
代理公司: 北京冠和权律师事务所11399 代理人: 朱健,陈国军
地址: 韩国*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 通过本发明的肝细胞分化诱导方法,效果在于,可有效地获得比现有技术多的数量的肝细胞。为此,尤其提出了一种来源于人类干细胞的肝细胞分化方法,其特征在于,作为肝细胞分化诱导前步骤包括A步骤,通过三步骤用TrypLETM选择对人类多能干细胞进行处理,并且只提炼高纯度的未分化干细胞;B步骤,用激活素A及CHIR99021同时对提炼的未分化干细胞进行处理,从而获得内胚层细胞;C步骤,用视黄酸(retinoic acid,RA)对获得的内胚层细胞进行处理,从而获得肝母细胞;以及D步骤,在使得获得的肝母细胞在用于分化的板上漂浮后,使其附着于可毒性评价的96孔板(well plate),并用HGF(肝细胞生长因子,hepatocyte growth factor)及DEX(地塞米松,Dexamethasone)进行处理,从而诱导肝细胞。
搜索关键词: 来源于 人类 干细胞 肝细胞 分化 方法
【主权项】:
一种来源于人类干细胞的肝细胞分化方法,其特征在于,作为肝细胞分化诱导前步骤包括:A步骤,通过三步骤用TrypLETM选择对人类多能干细胞进行处理,并且只精制高纯度的未分化干细胞;B步骤,用激活素A及CHIR99021同时对所述精制的未分化干细胞进行处理,从而获得内胚层细胞;C步骤,用视黄酸(RA)对所述获得的内胚层细胞进行处理,从而获得肝母细胞;以及D步骤,在使得所述获得的肝母细胞在用于分化的板上漂浮后,使其附着于可毒性评价的96孔板,并用HGF(肝细胞生长因子)及DEX(地塞米松)进行处理,从而诱导肝细胞。
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