[发明专利]快速获得绿原酸粗提物的方法

摘要

本发明公开了一种快速获得绿原酸粗提物的方法，包括配置培养基与培养基的灭菌；消毒处理乌苏里瓦韦根茎；外植体的接种；根茎愈伤组织培养；根茎愈伤组织的诱导；根茎愈伤组织的增值；提取乌苏里瓦韦愈伤组织中有效成分。可以快速提取乌苏里瓦韦活性成分，解决了开发资源量不足的问题。

主权项

一种快速获得绿原酸粗提物的方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：步骤1，配置培养基与培养基的灭菌；步骤2，消毒处理乌苏里瓦韦根茎；步骤3，外植体的接种；步骤4，根茎愈伤组织培养；a.根茎愈伤组织的诱导；以1/2MS为基本培养基，分别添加6‑BA 0.3mg·L‑1、2,4‑D 3mg·L‑1、IBA 1mg·L‑1作为培养基生长调节剂，培养基琼脂含量为7.0gL‑1，蔗糖含量为30.0g·L‑1，pH为5.8；将切成1cm的根茎小块接种于培养基上，置于恒温培养箱，在25±2℃下暗培养，培养30天；b.根茎愈伤组织的增值；以MS为基本培养基，添加6‑BA 0.3mg·L‑1、2,4‑D 3mg·L‑1、IBA 1mg·L‑1作为培养基生长调节剂，培养基琼脂含量为7.0g·L‑1，蔗糖含量为30.0g·L‑1，pH值为5.8；将愈伤组织切成0.5cm×0.5cm的小块接种于培养基上，置于恒温培养箱，在25±2℃下暗培养，增殖时间为25天；步骤5，乌苏里瓦韦愈伤组织中有效成分的提取；取乌苏里瓦韦根茎愈伤组织研碎后，加70％乙醇超声提取1h，其中料液比1:20，浓缩，再用正丁醇萃取，然后浓缩成浸膏，即得。