[发明专利]由组分VI制造AFOD静脉注射剂的方法

摘要

本主题涉及一种制造AFOD静脉注射剂的方法，包括将组分IV1+IV4糊剂与WFI一起溶解；加入乙酸钠，调节pH值，搅拌直至完全溶解；冷却；进行压滤；收集包含新发现的蛋白质KH 24、KH 25、KH 26和KH 27的AFOD糊剂；用缓冲液溶解糊剂；离心；用深度过滤器过滤；加入吐温‑80；冷却；调节pH值并在冷却的同时加入冷的醇；离心以获得第二AFOD糊剂；用缓冲液溶解第二糊剂并调节pH值；用深度过滤器过滤；超滤；接受WFI透析；纳米过滤去除病毒；浓缩并调节pH值；添加稳定剂；填装并进行无菌过滤，以得到AFOD静脉注射剂。本发明涉及液体或冻干形式的AFOD静脉注射剂，用于预防和杀死HIV‑1和HIV‑2。

主权项

1.一种制造AFOD静脉注射剂的方法，包括以下步骤：a)以1:9的稀释比用冷的注射用水(WFI)将组分IV1+IV4糊剂溶解以产生悬浮液；b)向该悬浮液中加入乙酸钠以达到20mM的浓度，将该悬浮液的pH调节至约3～8，并搅拌直至完全溶解；c)将该悬浮液冷却至0～20℃的温度；d)用过滤器进行压滤；e)收集包含新发现的蛋白质KH 24、KH 25、KH 26和KH 27的第一AFOD糊剂；f)在pH 3～8的条件下以1:9的稀释比用TRIS-HCL缓冲液将该第一AFOD糊剂溶解；g)在10℃的温度下离心该第一AFOD糊剂以获得上清液；h)用深度过滤器过滤该上清液以获得第一澄清滤液；i)在该第一澄清滤液中添加吐温-80至1重量％的浓度，以及TNBP至0.3重量％的浓度，同时将溶液在25℃的温度下保持6小时；j)将该溶液冷却至1℃的温度；k)调节pH至约3～8，加入冷的醇至10～40重量％的浓度，同时冷却直至温度为-5℃；l)离心以获得第二AFOD糊剂；m)在pH 3～8的条件下以1:50的稀释比用TRIS-HCL缓冲液将该第二AFOD糊剂溶解，并调节pH至约3～8，以获得第二溶液；n)用深度过滤器过滤该第二溶液以获得第二澄清滤液；o)用超滤膜将该第二澄清滤液超滤至3重量％的浓度；p)用10体积％的冷WFI透析该第二澄清滤液；q)用20nm过滤器对该第二澄清滤液进行纳米过滤以除去病毒；r)将该第二澄清滤液浓缩至7.5重量％蛋白质并将pH调节至约7；s)向该第二澄清滤液中加入白蛋白至2.5重量％的浓度作为稳定剂；并且t)填装并对该第二澄清滤液进行无菌过滤，以得到AFOD静脉注射剂。