[发明专利]通过MHC细胞文库检测新免疫原性T细胞表位和分离新抗原-特异性T细胞受体的方法

摘要

本发明涉及免疫疗法的领域，特别是过继性T细胞疗法、T细胞受体(TCR)基因疗法和接种疫苗。本发明提供一种制备编码TCR构建体的TCR α链构建体(TRA)和TCR β链构建体(TRB)的核酸的方法，所述TCR构建体对来自主要组织相容性复合物(MHC)上呈递的抗原的表位是特异性的，该方法包括使从供体分离的T细胞与人工抗原呈递细胞(APC)的文库接触，所述人工抗原呈递细胞包括表达存在于供体，优选地在K562细胞中的所有MHC I或MHC II等位基因的细胞。TCR构建体可在T细胞中表达，其对例如癌、病毒性感染或自身免疫性疾病的过继性T细胞疗法是有用的。本发明还提供一种鉴定由所述TCR识别的表位的方法。由所述TCR识别的免疫原性表位可被用来开发在患者中诱导抗原‑特异性T细胞免疫的疫苗制剂。本发明还提供两个TCR构建体和通过本发明的方法获得的各自的免疫原性表位的对，其中表位来自人乳头瘤病毒(HPV) 16(也称为α乳头瘤病毒9)癌蛋白E5和人巨细胞病毒(CMV)蛋白pp65。

主权项

编码T细胞受体(TCR)构建体的TCR α链构建体(TRA)和/或TCR β链构建体(TRB)的核酸，所述TCR构建体对与人MHC I复合的表位是特异性的，其中所述表位是人乳头瘤病毒16癌蛋白E5的表位，其中所述核酸可优选地获自包括以下的方法(a) 用呈递所述限定抗原的表位并与供体分享至少一个MHC等位基因的专职抗原呈递细胞，刺激从供体分离的T细胞，以富集抗原‑特异性T细胞；和(b) 使所述T细胞接触细胞文库，其中每个细胞表达单一MHC等位基因，其中所述文库包含表达存在于供体中的所有MHC I等位基因的细胞，和其中所述文库的细胞呈递所述限定抗原的表位；和(c) 选择由所述接触激活的T细胞，优选地基于由所述激活的T细胞表达的激活标记进行；和(d) 分离编码所述T细胞的TCR的TCR α和TCR β链的核酸。