[发明专利]核糖核酸的无细胞生成有效
申请号: | 201680019707.4 | 申请日: | 2016-03-30 |
公开(公告)号: | CN107614682B | 公开(公告)日: | 2021-11-09 |
发明(设计)人: | W.J.布莱克;D.S.坎宁安;D.麦凯克兰 | 申请(专利权)人: | 绿光生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N15/11;C12N15/10;C12N1/21;C40B40/08 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 在一些方面,本文中提供了用于核糖核酸的无细胞生成的方法和组合物。 | ||
搜索关键词: | 核糖核酸 细胞 生成 | ||
【主权项】:
生成用于核糖核酸(RNA)的无细胞生成的细胞裂解物的方法,所述方法包括:(a)将细胞培养至期望的细胞密度,其中所述细胞包含至少一种工程化核酸,所述工程化核酸含有与编码核酸酶的序列可操作连接的启动子,所述核酸酶包含蛋白酶识别位点并且与周质靶向序列连接,其中在所述细胞中将至少一种内源核糖核酸酶遗传失活或经由靶向蛋白水解失活;(b)裂解步骤(a)中生成的细胞,从而生成第一细胞裂解物,并且(c)在导致RNA解聚的条件下温育所述第一细胞裂解物,从而生成含有核苷酸5’‑单磷酸的第一细胞裂解物。
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