[发明专利]瓶内塑型快速培育难扦插繁殖的拟石莲属商品小盆栽方法

摘要

本发明公开一种瓶内塑型快速培育难扦插繁殖的拟石莲属商品小盆栽方法。通过两步获得商品小盆栽，第一步：优质塑型生根丛苗的诱导和培育。包括外植体选择与消毒、再生芽苗诱导、再生芽苗塑型及增殖培育、第二次塑型和壮苗生根。第二步：塑型生根丛苗移栽入盆驯化和后期标准化培育商品小盆栽。本发明解决了难叶插拟石莲属小盆栽的种苗繁殖困难、有效进种率低、单芽上盆后还需重组或整形、投产周期长等技术问题。组培有效进种率达89％以上，比常规方法缩短90～100天，成本降低，出圃盆栽整齐度高，特别对于拟石莲属一些利用田间叶插难以获得种苗的高端名品产品开发具有较高的经济效益和实际利用价值。

主权项

1.瓶内塑型快速培育难扦插繁殖的拟石莲属商品小盆栽方法，其特征在于包括以下步骤：(1)优质塑型生根丛苗的诱导和培育①外植体的选择与消毒选择无病虫害、无损伤的拟石莲属植物离体叶片为外植体，于室温阴凉干燥处晾过夜，第二天用浓度为1％v/v洗洁精水溶液洗1次后，置于自来水下冲洗0.5～1.0h，沥干表面水分，置于超净工作台，先用75％v/v酒精浸泡10s～15s，再用添加有Tween‑20的0.05％w/w氯化汞溶液浸泡5～6min，无菌水洗2～3min，最后用添加有Tween‑20的2.5％w/w次氯酸钠溶液浸泡3～5min，无菌水洗3次～5次，每次洗2～3min，获得无菌离体叶片，于无菌条件下，切除叶片中上部组织，保留从叶片基部之上、长度为1.5cm～2.5cm、含叶基部腋芽分生组织的叶片组织为无菌诱导外植体，备用；所述添加有Tween‑20的0.05％w/w氯化汞溶液为在100～120毫升的0.05％w/w氯化汞溶液添加2～3滴Tween‑20，所述添加有Tween‑20的2.5％w/w次氯酸钠溶液为在100～120毫升的2.5％w/w次氯酸钠溶液中添加2～3滴Tween‑20；②再生芽苗诱导将无菌诱导外植体斜插于盛有诱导培养基的组培瓶内，于23℃～25℃、空气相对湿度30％～50％的条件下暗培养10d～15d，后转为光培养，光培养条件为：温度23℃～25℃，空气相对湿度30％～50％，光照强度1000～1200lx，光照时间12～16h/d，培养10d～25d，所述诱导培养基为MS+ZT 1.0～2.0mg/L+NAA 0.1～0.2mg/L+硫酸腺嘌呤30～50mg/L+蔗糖25～30g/L+琼脂6.0～7.0g/L,pH值为5.5～6.0；③再生芽苗塑型增殖培育将通过步骤(1)②诱导出的丛生不定芽从叶基部以2～4个芽为一个芽丛切下，且留0.3～0.5cm的叶原基，进行第一次塑型，第一次塑型后的每一个芽丛转接于一个盛有增殖培养基的组培瓶内，在培养条件为：温度23～25℃，空气相对湿度30％～50％，光照强度1500～2000lx，光照时间12～16h/d的条件下培养20～30天；所述第一次塑型为：在每一个分切好的芽丛基部四周用灭菌接种刀尖等距或非等距纵向轻划3～5刀微伤口，微伤口大小长为0.1～0.2cm、深为0.02～0.05cm；所述增殖培养基为：MS+ZT 0.2～0.3mg/L+NAA 0.1～0.2mg/L+硫酸腺嘌呤30～50mg/L+蔗糖25～30g/L+活性炭300～500mg/L+琼脂6.0～7.0g/L,pH值为5.5～6.0；④壮苗生根和第二次塑型无菌条件下，取步骤(1)③所培养的苗团，以3～5个单株苗为一丛切分为一个苗丛，具体用无菌接种刀插入苗团的缝隙竖直向下切分为第二次塑型；后再将切分好的苗丛放入盛有壮苗生根培养基的组培瓶内，在与步骤(1)③相同的培养条件下培养25d～30d，所述壮苗生根培养基为：1/2MS+NAA 0.3～0.5mg/L+蔗糖25～30g/L+活性炭300～500mg/L+琼脂6.0～7.0g/L，pH值为5.5～6.0；(2)塑型生根丛苗移栽入盆驯化和后期标准化培育商品小盆栽①塑型生根丛苗移栽将步骤(1)④培养获得的生根瓶苗置于过渡温室内，在自然温度和自然光照条件下放置5～7d后，取出植株，洗除培养基，放于阴凉处晾去表面水分，移栽到装有无土栽培基质的花盆，浇透水；所述无土栽培基质用草炭土∶珍珠岩∶鹿沼土按2:1:1体积比的比例混合而成；移栽后放入温室，花盆上方搭建遮光率为70％的遮阳网，此后每天早晚各喷雾1次水，保持温室内温度为18～25℃，温室内空气相对湿度为85％以上；②标准化培育商品小盆栽步骤(2)①移栽成活后，撤去遮阳网，保持温室内温度为18～28℃，空气相对湿度保持为60～65％，每3～4天浇一次透水，每15天浇施一次2000倍液复合肥，所述复合肥中N﹕P2O5﹕K2O的质量比为17﹕17﹕17；每周喷施一次70％甲基托布津可湿性粉剂1500倍液；发现蚜虫时，喷施10％吡虫啉可湿性粉剂1000倍液。