[发明专利]一种乳腺癌干细胞冻存保护剂及制成的冻存保护试剂盒在审
申请号: | 201611173799.X | 申请日: | 2016-12-19 |
公开(公告)号: | CN106386787A | 公开(公告)日: | 2017-02-15 |
发明(设计)人: | 杨超;高云雷;其他发明人请求不公开姓名 | 申请(专利权)人: | 南京千年健干细胞基因工程有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211505 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种乳腺癌干细胞冻存保护剂及制成的冻存保护试剂盒,冻存保护剂由无血清培养基冻干粉和胎牛血清FBS组成;所述无血清培养基冻干粉由如下方法制备在DMEM/F12培养液中添加常规生长因子、加兰他敏和石蒜碱,常规生长因子包括重组人表皮生长因子EGF、牛血清白蛋白BSA、胰岛素和B27,配制成EGF浓度为15‑25g/L、BSA浓度为3‑5g/L、胰岛素浓度为4‑6mg/L、浓度为1.5‑2.5%、加兰他敏浓度为50‑100nmol/L、石蒜碱浓度为50‑100nmol/L的培养液,于37℃、5%CO2条件下摇床保存20‑28h,冷冻干燥。本发明冻存保护剂能有效减少冻存对乳腺癌干细胞的损伤,复苏后的细胞存活率高,致瘤能力强,与冻存前无显著差异,显著优于现有技术。 | ||
搜索关键词: | 一种 乳腺癌 干细胞 保护 制成 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种乳腺癌干细胞冻存保护剂,用于冻存保护MCF‑7乳腺癌干细胞,其特征在于:由无血清培养基冻干粉和胎牛血清FBS组成;所述无血清培养基冻干粉由如下方法制备:在DMEM/F12培养液中添加常规生长因子、加兰他敏和石蒜碱,常规生长因子包括重组人表皮生长因子EGF、牛血清白蛋白BSA、胰岛素和B27,配制成EGF浓度为15‑25g/L、BSA浓度为3‑5g/L、胰岛素浓度为4‑6mg/L、浓度为1.5‑2.5%、加兰他敏浓度为50‑100nmol/L、石蒜碱浓度为50‑100nmol/L的培养液,于37℃、5%CO2条件下摇床保存20‑28h,冷冻干燥。
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