[发明专利]一种纯化耦合固定化腺苷酸环化酶的制备方法在审
| 申请号： | 201611122284.7 | 申请日： | 2016-12-08 |
| 公开（公告）号： | CN106480011A | 公开（公告）日： | 2017-03-08 |
| 发明（设计）人： | 应汉杰;朱倩倩;庄伟;牛欢青;吴菁岚;周精卫;陈勇;陈晓春;朱晨杰;柳东 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N11/08 | 分类号： | C12N11/08;C12N15/70;C12P19/40;C12R1/19 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 | 代理人： | 丁静静,肖明芳 |
| 地址： | 210009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种纯化耦合固定化腺苷酸环化酶的制备方法，(1)制备亲和吸附介质将5～100g的表面修饰亚氨基二乙酸的金属螯合树脂载体加入到10～200mL、0.01～1mol/L的NiCl2.6H2O溶液中，在25～30℃、150～200rpm条件下振荡2～4h，抽滤获得亲和吸附介质；(2)酶的固定化取0.1～1g步骤(1)得到的亲和吸附介质，加入1.5～15mL浓度为0.1～2mg/mL的腺苷酸环化酶溶液，所述腺苷酸环化酶上带有组氨酸标签，在25～30℃、150～200rpm条件下振荡2～4h，离心，得到固定化腺苷酸环化酶。通过本发明得到的固定化酶具有酶活高、能反复使用、酶活损失少等优势。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 纯化 耦合 固定 腺苷酸环化酶 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种纯化耦合固定化腺苷酸环化酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备亲和吸附介质：将5～100g的表面修饰亚氨基二乙酸的金属螯合树脂载体加入到10～200mL、0.01～1mol/L的NiCl2.6H2O溶液中，在25～30℃、150～200rpm条件下振荡2～4h，抽滤获得亲和吸附介质；(2)酶的纯化及固定化：取0.1～1g步骤(1)得到的亲和吸附介质，加入1.5～15mL浓度为0.1～2mg/mL的腺苷酸环化酶溶液，所述腺苷酸环化酶上带有组氨酸标签，在25～30℃、150～200rpm条件下振荡2～4h，离心，得到固定化腺苷酸环化酶。
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