[发明专利]生长因子诱导生成神经前体细胞的方法有效
| 申请号： | 201611097574.0 | 申请日： | 2016-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN108148807B | 公开（公告）日： | 2020-10-09 |
| 发明（设计）人： | 高绍荣;高睿;陈嘉瑜;张林凤;臧茹歌;刘文强;陈珺 | 申请（专利权）人： | 同济大学;上海捷易生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0797 | 分类号： | C12N5/0797 |
| 代理公司： | 上海沪慧律师事务所 31311 | 代理人： | 朱九皋 |
| 地址： | 200092 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种生长因子诱导生成神经前体细胞的方法。它是步骤是：A通过向基础培养基中添加特定生长因子，来调控细胞上下游的信号通路，细胞因子使用包括：LIF(白血病抑制因子)、B27(不含维他命A)、肝素、FGF‑2和EGF，通过这些因子的组合，可以将哺乳动物体细胞去分化到部分重编程状态；B接着采用神经类细胞维持传代的生长因子N2、B27(含维他命A)、FGF2、EGF等将这种部分重编程状态的细胞继续分化为功能性的神经前体细胞；C将诱导获得的神经前体细胞在神经干细胞培养基中进一步培养，可进行扩增和保存。本发明的方法一方面规避了传统病毒介导的诱导方法的外源基因插入，免疫原性；又通过使用生长因子降低了潜在的致瘤性；另一方面，又极大改善了已有的小分子化合物诱导方法中存在的效率偏低的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 生长因子 诱导 生成 神经 体细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种生长因子诱导生成神经前体细胞的方法，其特征在于：它包括如下步骤：A通过向基础培养基中添加特定生长因子，来调控细胞上下游的信号通路，细胞因子使用包括：LIF(白血病抑制因子)、B27(不含维他命A)、肝素、FGF‑2和EGF，通过这些因子的组合，可以将哺乳动物体细胞去分化到部分重编程状态，该过程需要约2周时间；B接着采用神经类细胞维持传代的生长因子N2、B27(含维他命A)、FGF2、EGF等将这种部分重编程状态的细胞继续分化为功能性的神经前体细胞；该过程需要约10天时间，即可最终获得有功能的神经前体细胞；C将诱导获得的神经前体细胞在神经干细胞培养基中进一步培养，可进行扩增和保存。
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