[发明专利]一种金黄色葡萄球菌的电化学检测方法

摘要

本发明公开了一种金黄色葡萄球菌的电化学检测方法。具体步骤如下：利用模板法制备有序介孔碳纳米材料CMK‑3，并将其进行表面羧基功能化修饰，得到一种羧基功能化的介孔碳纳米材料O‑CMK‑3；利用化学共价结合技术将蛋白分选酶A(Srt A)固定于上述羧基功能化介孔碳纳米材料O‑CMK‑3表面，得到固定化分选酶纳米复合材料O‑CMK‑3‑M；将上述固定化酶纳米复合材料与石墨、石蜡等材料制成碳糊电极，没入不同浓度的金黄色葡萄球菌菌液，采用三电极检测系统检测金黄色葡萄球菌。较现有检测技术方法具有检测时间短、操作方便、可重复利用等优点，具有良好的应用前景。

主权项

1.一种金黄色葡萄球菌的电化学检测方法，包括步骤如下：(1)制备羧基功能化的介孔碳材料O‑CMK‑3：300mg CMK‑3浸入到15mL 1.75mol/L过硫酸铵溶液和15mL 2mol/L硫酸溶液中，40℃下水浴搅拌24h，利用湿氧化法得到有序的羧基功能化的介孔碳材料O‑CMK‑3；(2)制备固定化分选酶介孔碳纳米复合材料O‑CMK‑3‑M：5mg EDC和6mg NHS加入30mL Tris‑HCL缓冲液中，取30mg羧基功能化的介孔碳材料O‑CMK‑3加入Tris‑HCL缓冲液中，室温下超声分散30min，取1mL 11.486mg/mL分选酶加入Tris‑HCL缓冲液中，37℃条件下150rpm震荡培养8h，离心取沉淀，制得固定化分选酶介孔碳纳米复合材料；(3)取0.015g固定化分选酶介孔碳纳米复合材料，0.065g石墨，与24uL的液体石蜡研磨均匀，制成碳糊电极，没入金黄色葡萄球菌菌液中检测。