[发明专利]一种SD大鼠胰腺导管上皮细胞模型的构建方法

摘要

本发明公开了一种SD大鼠胰腺导管上皮细胞模型的构建方法，它包括大鼠，其特征在于还包括动物选择及麻醉、大鼠主胰管的外科分离、主胰管化学消化和细胞类型鉴定步骤。该构建方法根据SD大鼠的胰腺解剖结构直接肉眼下分离主胰管，对胰腺导管上皮细胞的分离获得率较高，所得的胰腺导管上皮细胞受到刺激较少，能稳定传代。方法简便易行，成功率高，为胰腺疾病的研究提供了来源丰富可靠的新型细胞模型。

主权项

一种SD大鼠胰腺导管上皮细胞模型的构建方法，它包括大鼠，其特征在于还包括以下步骤：（1）、动物选择及麻醉，择用体重300～400g雄性SD大鼠壹只，并对其作腹腔注射麻醉；（2）、大鼠主胰管的外科分离，对麻醉后的雄性大鼠作腹部消毒，在腹部正中切口打开腹腔，找到出胰腺，切下主胰管，放入培养皿加入培养液培养，得主胰管；（3）、主胰管化学消化，将步骤（2）获得的主胰管放入离心管，分别加入胶原酶、溶液PBS和蛋白酶相关的消化溶液进行水浴消化与震荡分离，将胰腺导管上皮细胞分离成包含在悬液及漂浮组织中，用移液器吸出离心管内的悬液及漂浮组织置入无菌离心管内收集，加入培养液，得胰腺导管上皮细胞悬液及漂浮组织；（4）、细胞类型鉴定，取经化学消化后无菌离心管内包含胰腺导管上皮细胞的悬液及漂浮组织，采用免疫印迹法检测细胞中的细胞角蛋白19和细胞角蛋白7，表达为阳性者为胰腺导管上皮细胞。