[发明专利]一种猪肉中苯乙醇胺的检测方法

摘要

本发明公开了一种猪肉中苯乙醇胺的检测方法，将捣碎后的猪肉经乙酸铵水溶液、乙腈+乙醇混合液高速充分匀浆，超声提取，离心，取上清液，重复一次，得提取液，加入正己烷混匀后离心，得下层清液体，经滤膜过滤、氮气吹，加入二甲基亚砜后，用乙酸铵水溶液定容得待测溶液；将待测溶液经超高效液相色谱‑串联质谱联用仪检测，得待测溶液的超高效液相色谱图；绘制标准曲线；根据待测溶液的超高效液相色谱图中苯乙醇胺的峰面积及其对应的标准品的标准曲线，计算出猪肉中苯乙醇胺的含量。本发明样品前处理分析简单易行，不需要固相萃取等净化方式，在大大提高检测效率的同时降低了昂贵的成本消耗，快速准确检测。

主权项

一种猪肉中苯乙醇胺的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）称取2‑4g捣碎后的猪肉于离心管中，加入3‑5mL乙酸铵水溶液，4‑7mL乙腈+乙醇混合液，高速充分匀浆，混匀后超声提取4‑10min，离心，取上清液A，剩余残渣加入6‑10mL乙腈+乙醇混合液，超声提取4‑10min，离心、取上清液B与上清液A合并，得提取液，加入6‑10mL正己烷，混匀后离心，得下层清液体，取其中3‑6mL，经滤膜过滤到带刻度的离心管中，40℃水浴下氮气吹至1‑1.2mL，加入200μL二甲基亚砜后，用乙酸铵水溶液定容至1.5mL刻度线，得待测溶液；（2）将步骤（1）所得的待测溶液经超高效液相色谱‑串联质谱联用仪检测，得待测溶液的超高效液相色谱图，色谱条件为：以碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径≤5μm；梯度洗脱：流动相A为含体积分数0.1%的甲酸的甲醇溶液，流动相B为含体积分数0.1%的甲酸的水溶液；色谱柱温度为40℃；进样量10μL，流速为0.3μL/min；质谱条件为：ESI正负离子同时扫描模式，毛细管电压分别为3.5kV和3.0kV，源温145℃，去溶剂气温度：450℃；去溶剂气氮气流速：900L/h；锥孔气氮气流速：50L/h；碰撞气体：氩气3.3×10‑3mba；多反应监测模式检测；（3）绘制标准曲线：取苯乙醇胺的标准品，配制成不同浓度的混合的标准工作液，按照步骤（2）相同条件进行测试，得标准工作液的超高效液相色谱图，对苯乙醇胺标准品，按照其浓度和峰面积，绘制标准曲线，得到苯乙醇胺标准品的标准曲线；（4）根据步骤（2）中待测溶液的超高效液相色谱图中苯乙醇胺的峰面积及其对应的标准品的标准曲线，计算出猪肉中苯乙醇胺的含量。