[发明专利]一种烟草八倍体纯合植株的快速培养方法有效
申请号: | 201611005134.8 | 申请日: | 2016-11-11 |
公开(公告)号: | CN106561461B | 公开(公告)日: | 2019-11-19 |
发明(设计)人: | 党江波;梁国鲁;杨超;郭启高;陈益银;李晓林;孙海艳;何桥;张艳 | 申请(专利权)人: | 中国烟草总公司重庆市公司烟草科学研究所;西南大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 11491 北京国坤专利代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 郭伟红<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | 本发明公开了一种烟草八倍体纯合植株的快速培养方法,将烟草幼苗或烟草植株茎尖经秋水仙素活体诱导染色体加倍,取变异植株或变异叶片进行组织培养,对再生植株进行检测,获得八倍体植株。本发明的方法同样保证了诱导的成功率,操作简易,且时间较短。 | ||
搜索关键词: | 一种 烟草 八倍体纯合 植株 快速 培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种烟草八倍体纯合植株的快速培养方法,其特征在于,具体按照以下步骤进行:/n种子处理:/n步骤1,取四倍体烟草种子若干,于30℃温水中浸泡过夜8-10h后捞出,于25℃保湿黑暗催芽,以提高种子萌发率和萌发整齐度;/n步骤2,待种子露白后,用0.2%秋水仙素溶液浸泡48h进行诱导,使染色体加倍;此时胚处于快速生长期,有利于八倍体诱导;/n步骤3,去除秋水仙素溶液,露白种子于蒸馏水中漂洗3次,并浸泡2次,每次2h,以清除种子内残留的秋水仙素;/n步骤4,清洗后的种子于25℃光照下培养3-5d,待子叶打开,生长成苗;/n步骤5,待子叶完全打开后,选取生长缓、矮壮的变异植株为材料;/n步骤6,将选取的植株去除种壳后,包于一层纱布中,用细线扎纱布开口处,于0.1%的HgCl2溶液中进行表面灭菌,无菌水清洗3次后接种于诱导增殖培养基MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/L NAA上;/n步骤7,40d后,待不定芽生长至3-5cm,切取不定芽于生根培养基1/2MS+2.0mg/L IBA中,7-10d后即可生根;/n步骤8,倍性鉴定及移栽:切取根尖用流式细胞仪进行倍性鉴定,并采用去壁低渗火焰干燥法进行染色体制片进行确认后移栽,即可筛选获得八倍体植株。/n
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