[发明专利]一种超声波辅助提取羔羊第四胃有效成分的快速制备方法

摘要

本发明涉及一种超声波辅助提取羔羊第四胃有效成分的快速制备方法，该方法将脱脂羔羊第四胃粉在低温下加入磷酸盐缓冲液溶解，进行超声，然后利用盐酸溶液调节pH值，低温下激活，再用氢氧化钠溶液调节pH值，过滤，离心，弃渣，上清液透析脱盐，离心去除透析形成的沉淀物（盐溶蛋白）后，冷冻干燥即得羔羊第四胃有效成分。经测试本发明获得的有效成分提取物蛋白含量达到71.5%，凝乳酶活性为26916 Ru/g，胃蛋白酶活性为3685.2 u/g，十二烷基硫酸钠‑聚丙烯酰胺凝胶电泳图中凝乳酶及胃蛋白酶条带清晰。与传统搅拌自溶方法相比，该方法制备羔羊第四胃有效成分所需时间可显著缩短，且生物活性不减，易于扩大规模生产，是制备羔羊第四胃活性成分的理想方法之一。

主权项

一种羔羊第四胃有效成分提取物的快速制备方法，其特征在于按下列步骤进行：a、取新鲜羔羊第四胃，利用预冷的蒸馏水流水清洗，剥除脂肪及结缔组织，温度‑24 ℃下冷冻保存；b、将步骤a所得羔羊第四胃剪碎，在温度‑80℃下冷冻12小时，冷冻干燥，粉碎机粉碎，即得羔羊第四胃粉；c、将步骤b所得羔羊第四胃粉加入石油醚机械搅拌，脱脂2次，即得脱脂羔羊第四胃粉，在温度‑24 ℃下冷冻保存；d、将步骤c所得脱脂羔羊第四胃粉加入22倍体积预冷过的磷酸盐缓冲液0.1 moL/L ，ph=7.0溶解，在超声功率260瓦下，超声18分钟，得到提取液；e、将步骤d提取液用1 moL/L的盐酸溶液调节pH值为3.3，温度‑4 ℃下活化12小时；f、将步骤e活化后的提取液用1 moL/L的氢氧化钠溶液调节pH值为5.6，用纱布过滤，在8000转/分下，离心8 分钟，弃渣，上清液进行透析脱盐，每2小时换1次蒸馏水，透析48 小时；g、将步骤f透析的提取液，在8000转/分下，离心8 分钟去除盐溶蛋白，上清液进行冷冻干燥，即得羔羊第四胃有效成分提取物，冷冻保存。