[发明专利]一种猪瘟病毒基因工程亚单位疫苗兔体效力检验方法

摘要

本发明的目的是提供一种猪瘟基因工程亚单位疫苗效力检验的方法，是用待检测的猪瘟基因工程亚单位疫苗免疫家兔，免疫21日龄后ELISA检测猪瘟病毒抗体水平或采用猪瘟脾淋苗静脉注射进行攻毒，当免疫兔至少4/5的猪瘟病毒抗体阻断率S/P≥60％或攻毒后至少4/5兔体无定型热反应，即可判为合格。本发明的疫苗兔体效力检验方法不仅能够检验猪瘟基因工程亚单位疫苗的保护效力，还更加稳定、简便、有效、节省时间和成本评价猪瘟基因工程亚单位疫苗的效力，弥补了现有技术的不足，对后期的大规模生产培养工艺优化具有积极的评价指导作用，更有利于指导猪瘟基因工程亚单位疫苗产品的临床应用，具有广阔的市场应用前景。

主权项

1.一种猪瘟基因工程亚单位疫苗效力检验的方法，其特征在于，所述的方法是用待检测的猪瘟基因工程亚单位疫苗免疫家兔，免疫21日龄后ELISA检测猪瘟病毒抗体水平或采用猪瘟脾淋苗静脉注射进行攻毒，当免疫兔至少4/5的猪瘟病毒抗体阻断率S/P≥60％或攻毒后至少4/5兔体无定型热反应，即判为合格；所述的方法包括如下的步骤：1)分组及免疫接种：选取体重为1.5～3kg健康易感家兔，从中挑选体温波动不大的随机分组，采用猪瘟脾淋毒作为阳性对照组和未免疫接种作为阴性对照组，而在实验组中接种待检测的猪瘟基因工程亚单位疫苗；2)猪瘟病毒ELISA抗体检测免疫后第21天，采集各组兔的血液，分离血清，检测该疫苗免后21天猪瘟病毒抗体水平；3)检测结果判定：当免疫兔至少4/5的猪瘟病毒抗体阻断率S/P≥60％时，判定疫苗合格；所述的方法或包括如下的步骤：1)分组及免疫接种：选取体重为1.5～3kg健康易感家兔，从中挑选体温波动不大的随机分组，采用猪瘟脾淋毒作为阳性对照组和未免疫接种作为阴性对照组，而在实验组中接种待检测的猪瘟基因工程亚单位疫苗；2)免疫后第21d攻毒实验用无菌生理盐水将20头份猪瘟脾淋毒稀释成1头份/ml，注射给每组家兔，攻毒剂量为lml/只，攻毒前2天和攻毒当天上下午各测体温1次，24小时后，每隔6h测体温1次，连续测5d至体温恢复正常；3)检测结果判定：至少4/5数量的注射组兔体无定型热反应，即可判定疫苗效力为合格；所述的猪瘟基因工程亚单位疫苗为HEK‑293‑E2疫苗。