[发明专利]石竹花色调控关键酶基因CHS沉默体系的建立方法和应用有效
申请号: | 201610921317.8 | 申请日: | 2016-10-15 |
公开(公告)号: | CN106560517B | 公开(公告)日: | 2020-02-04 |
发明(设计)人: | 贺学勤;刘佳;王志达 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00;A01H6/30 |
代理公司: | 61244 西安汇恩知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 邢立立 |
地址: | 010019 内蒙古*** | 国省代码: | 内蒙;15 |
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摘要: | 本发明公开了一种石竹花色调控关键酶基因CHS沉默体系的建立方法及应用,从石竹幼苗叶片中提取mRNA,以反转录的cDNA为模板,根据香石竹CHS基因的保守序列设计引物,通过RT‑PCR采用所设计的引物进行扩增,获得407bp的扩增产物;获得的407bp大小的片段连接到pGEM T‑easy上,得CHS片段;将连接到载体pGEM T‑easy上的CHS片段用EcoRI酶切后连接到采用同样酶切后的TRV2载体上,得重组质粒pTRV2/DcCHS | ||
搜索关键词: | 石竹 花色 调控 关键 基因 chs 沉默 体系 建立 方法 应用 | ||
【主权项】:
1.石竹花色调控关键酶基因CHS沉默体系的建立方法,其特征在于,包括如下步骤:/nS1、从石竹幼苗叶片中提取mRNA,以反转录的cDNA为模板,根据香石竹CHS基因的保守序列设计引物,通过RT-PCR采用Forward:GTCGCTTCATGCTCTACCAAC及Reverse:GCTAGGACTGAACGCATCCTC进行扩增,获得407bp的扩增产物;/nS2、将获得的407bp大小的片段连接到pGEM T-easy上,测序得CHS片段;/nS3、将连接到载体pGEM T-easy上的CHS片段在37℃用EcoRI酶切后连接到采用同样酶切后的TRV2载体上,得重组质粒pTRV2/DcCHS
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