[发明专利]一种定量测定烟草中Amadori化合物的分析方法

摘要

本发明属于烟草成分检测技术领域，具体是一种定量测定烟草中Amadori化合物的分析方法，包括下列步骤：1）制样：将烟叶或烟丝样品研磨成粉，过40目筛；2）萃取：称取烟末样品，加入甲醇/水溶液，超声萃取，萃取液高速离心后，取上清液过滤；3）稀释：将滤液用甲醇稀释，得样品溶液；4）测定：样品溶液采用HPLC‑MS/MS的MRM模式进行测定。本发明利用萃取溶剂直接萃取粉碎的烟叶/烟丝样品，离心、过滤、稀释后直接采用HPLC‑MS/MS测定，可同时对烟草中10种Amadori化合物进行检测，具有操作简单、快速、温和，方法的重现性及回收率好、准确性及灵敏度高、测定Amadori化合物种类多的优点。

主权项

1.一种定量测定烟草中Amadori化合物的分析方法，其特征在于：包括下列步骤： 1）将烟叶或烟丝样品研磨成粉，过40目筛；2）称取烟末样品50～200 mg，加入20～40 mL 甲醇/水溶液，超声萃取20～40 min；在5000～10000rpm转速下离心3～10min后，取上清液过滤，得滤液；3）将上清液用稀释溶剂稀释5～20倍后，得样品溶液；4）样品溶液直接用于HPLC‑MS/MS分析，采用外标法定量测定以下10种amdori 化合物含量，10种amdori 化合物具体为：Glucosamine、Fru‑Ala、Fru‑Asa、Fru‑Glu、Fru‑Prp、Fru‑Val、Fru‑Lle、Fru‑Leu、Fru‑Phe、Fru‑Trp；HPLC‑MS/MS分析条件如下：采用规格为250 mm × 2.1 mm i.d., 5.0 μm 的Atlantis HILIC Silica色谱柱；柱温：25 oC；进样量：5 μL；流速：600 μL/min；流动相：A. 0.2%甲酸溶液，B. 乙腈；洗脱梯度：0 ‑0.1min，10.5%B到22%B，0.1‑10 min, 22%B；离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描模式：正离子扫描；检测方式：多反应监测（MRM）；气帘气压力：15psi； 碰撞气压力：7 psi；喷雾电压（Capillary voltage）：5500 V；雾化温度：550 oC ；雾化气压力：60psi； 辅助气压力：75 psi。