[发明专利]用少量样品快速富集、分离、鉴定和定量内源转录因子及其复合物的方法及其专用装置在审
申请号: | 201610917464.8 | 申请日: | 2016-10-20 |
公开(公告)号: | CN106546674A | 公开(公告)日: | 2017-03-29 |
发明(设计)人: | 秦钧;贺福初;丁琛;石文昊;李恺 | 申请(专利权)人: | 北京蛋白质组研究中心 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/08;G01N30/14 |
代理公司: | 北京尚诚知识产权代理有限公司11322 | 代理人: | 鲁兵 |
地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种用少量样品快速富集、分离、鉴定和定量内源转录因子及其复合物的方法及其专用装置。该方法利用转录因子及其复合物可与序列特异性DNA元件结合的特点,将从生物样本中提取的核蛋白或全蛋白在专用装置TOT柱中与结合有转录因子串联结合序列(TFRE DNA,DNA诱饵)的磁珠进行微量体积的孵育,从核蛋白或全蛋白中高效富集、分离内源转录因子及其复合物,后续进一步进行转录因子及其复合物的鉴定、定量。本发明的方法快速、稳定、高效、可重复,可广泛应用于生物研究、医学检验、药物筛选等方面,本发明的专用装置应用简便、可储存、体积小,可将其制备成试剂盒,应用于临床检测、科学研究等领域中,应用前景广阔。 | ||
搜索关键词: | 少量 样品 快速 富集 分离 鉴定 定量 内源 转录 因子 及其 复合物 方法 专用 装置 | ||
【主权项】:
用少量样品快速富集、分离、鉴定和定量内源转录因子及其复合物的方法,包括以下步骤:从生物样本中提取核蛋白或全蛋白样品,将生物素标记的转录因子串联结合序列(TFRE DNA,DNA诱饵)与生物素亲和素包被的磁珠混合,将提取的核蛋白或全蛋白与结合有转录因子串联结合序列的磁珠混合进行孵育,取得与转录因子串联结合序列特异结合的蛋白(即内源转录因子及其复合物短肽),将内源转录因子及其复合物短肽与磁珠分离,对分离的内源转录因子及其复合物短肽进行LC‑MS(液相色谱‑质谱联用)检测,并用生物信息学工具和方法确定内源转录因子及其复合物的种类、名称及其含量。
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