[发明专利]一种以红花石蒜花序轴为外植体诱导不定芽的方法

摘要

本发明提供了一种以红花石蒜花序轴为外植体诱导不定芽获取再生植株的方法，包括下述步骤：外植体的选取与消毒、不定芽诱导、继代培养与增殖、根的诱导、将组培苗移栽。本发明方法诱导萌动率达到96%，单株增殖不定芽4.9倍以上，生根率达到94%，通过该方法能够有效的解决红花石蒜离体快速繁殖的问题。

主权项

一种以红花石蒜花序轴为外植体诱导不定芽获取再生植株的方法，其特征在于，包括下述步骤：步骤A）外植体选择与消毒：选取红花石蒜初花期的花轴为外植体进行消毒；所述消毒方法为：用洗涤剂振摇15min，流水冲洗30min后，于无菌操作台上用75%乙醇消毒30s，再用升汞消毒15min，最后用无菌水洗涤5次，每次洗1min；步骤B）不定芽的诱导：消毒后的外植体切割成0.5‑1.0cm长度，接种于诱导培养基中进行不定芽诱导，光照时间10‑14h/天，光照强度为1600‑1800lx；所述诱导培养基组分为：MS+6‑BA 2mg/L +玉米素0.3mg/L + GA₃ 0.8mg/L；步骤C）继代培养与增殖：将步骤B）中所得红花石蒜不定芽切割后接入继代培养基中进行继代培养，光照强度为1600‑1800lx；所述继代培养基组分为：MS+6‑BA 2mg/L +NAA0.2 mg/L；步骤D）根的诱导：将经过步骤C）培养后的红花石蒜试管苗接入生根培养基中进行生根培养，获得组培苗；所述生根培养基组分为：1/2MS+IBA1.0 mg/L；步骤E）组培苗移栽：将瓶盖打开，组培苗炼苗2天，将组培苗的根浸泡在复合微生物制剂中10min，移栽入基质中，所述复合微生物制剂为：按照淡紫灰链霉菌发酵液：黄绿木霉发酵液：假丝酵母菌发酵液：粪产碱杆菌发酵液：草炭：磷酸氢二钠的重量比＝2：3：4：3：5：2混匀即得。