[发明专利]一种用于检测胃泌素17的试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于检测胃泌素17的试剂盒。本发明提供了一种用于检测人胃泌素17的试剂盒，包括组件1和组件2；所述组件1为包被有G‑17‑BSA的微孔板；所述G‑17‑BSA为多肽，自N末端至C末端依次含有如下两个区段：G‑17多肽和牛血清白蛋白成熟肽；所述G‑17多肽为：在序列表的序列1所示多肽的N末端第一个氨基酸残基末端连接一个焦谷氨酸得到的多肽；所述组件2为酶结合物溶液；所述酶结合物溶液中含有HRP标记的小鼠抗G‑17单克隆抗体。本发明提供的试剂盒可用于检测人血液样本中的胃泌素17的含量，从而可用于评估或预测胃粘膜状态或状况，诊断萎缩性胃炎，胃癌高危人群的筛查，从而可用于评价消化道系统生理病理状态。

主权项

1.一种用于检测人胃泌素17的试剂盒，包括组件1、组件2、组件3、组件4和组件5；所述组件1为包被有G‑17‑BSA的微孔板；所述G‑17‑BSA为多肽，自N末端至C末端依次含有如下两个区段：G‑17多肽和牛血清白蛋白成熟肽；所述G‑17多肽为：在序列表的序列1所示多肽的N末端第一个氨基酸残基末端连接一个焦谷氨酸得到的多肽；所述组件2为酶结合物溶液；所述酶结合物溶液由溶质和溶剂组成；所述溶剂为pH7.4、0.02M的PBS缓冲液；所述溶质及其在酶结合物溶液中的浓度如下：HRP标记的小鼠抗G‑17单克隆抗体的体积百分含量为0.02％、酪蛋白0.1g/100ml、Proclin‑300的体积百分含量为0.02％、BSA2g/100ml；所述组件3为20×浓缩洗液；20×浓缩洗液由溶质和溶剂组成；溶剂为pH7.4、0.2mol/L的PBS缓冲液；所述溶质及其在20×浓缩洗液中的浓度如下：Tween 20的体积百分含量为1％；所述组件4为发光液A和发光液B；发光液A由溶质和溶剂组成；所述溶剂为pH8.0、0.2mol/L的Tris‑HCl缓冲液；所述溶质及其在发光液A中的浓度如下：鲁米诺3mg/ml、对碘苯酚0.25mg/ml、四苯硼钠0.5mg/ml；发光液B由溶质和溶剂组成；所述溶剂为pH8.0、0.2mol/L的Tris‑HCl缓冲液；所述溶质及其在发光液B中的浓度如下：过氧化脲0.5mg/ml；所述组件5为G‑17标准品溶液；G‑17标准品溶液由S0溶液、S1溶液、S2溶液、S3溶液、S4溶液和S5溶液组成；S0溶液为含1g/100ml BSA和体积百分含量为0.02％的Proclin‑300的pH7.4、0.02M的PBS缓冲液；S1溶液、S2溶液、S3溶液、S4溶液和S5溶液均为含G‑17、1g/100ml BSA和体积百分含量为0.02％的Proclin‑300的pH7.4、0.02M的PBS缓冲液；S1溶液中，G‑17的浓度为20pg/ml；S2溶液中，G‑17的浓度为100pg/ml；S3溶液中，G‑17的浓度为200pg/ml；S4溶液中，G‑17的浓度为500pg/ml；S5溶液中，G‑17的浓度为1000pg/ml；所述包被有G‑17‑BSA的微孔板的制备方法如下：(1)用pH9.6、0.05mol/L的CB缓冲液稀释G‑17‑BSA，得到蛋白浓度为2μg/ml的包被液；(2)取微孔板，每孔加入100μl步骤(1)制备的包被液，2‑8℃静置18‑24h，然后弃除孔内液体；(3)完成步骤(2)后，取所述微孔板，每孔加入200μl封闭液，2‑8℃静置18‑24h，然后弃除孔内液体；封闭液由溶质和溶剂组成；所述溶剂为pH7.4、0.02M的PBS缓冲液；所述溶质及其在封闭液中的浓度如下：蔗糖8g/100ml、BSA0.5g/100ml、酪蛋白0.5g/100ml；(4)完成步骤(3)后，取所述微孔板，在20‑30℃、湿度<40％的环境中干燥18‑24h。