[发明专利]一种热稳定突变芳香基硫酸酯酶、基因及其应用有效
申请号: | 201610878475.X | 申请日: | 2016-10-09 |
公开(公告)号: | CN106399334B | 公开(公告)日: | 2019-07-19 |
发明(设计)人: | 朱艳冰;乔超超;倪辉;肖安风;杨远帆;李利君;杜希萍 | 申请(专利权)人: | 集美大学 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N9/16;C12N15/70 |
代理公司: | 厦门创象知识产权代理有限公司 35232 | 代理人: | 尤怀成 |
地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明公开了一种热稳定突变芳香基硫酸酯酶、基因及其应用。利用易错PCR技术引入随机诱变,构建P.carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变体库。经过筛选,获得热稳定性提高的突变芳香基硫酸酯酶。结果表明,与WT相比,H260L的热稳定性明显提高。以对硝基苯硫酸钾为底物,H260L的最适反应温度和pH分别为55℃和8.0。H260L在6.0‑9.0的pH范围内稳定。EDTA对突变酶活力有强烈抑制作用,说明金属离子在突变酶的催化过程中起重要作用。H260L对洗涤剂,具有良好的耐受性。H260L对龙须菜粗多糖硫酸基团的脱硫率为82%。本发明也同时获得了含上述突变芳香基硫酸酯酶基因的基因工程菌,实现了酶的异源表达,为该酶的工业化生产和应用提供了良好的基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 稳定 突变 芳香 硫酸酯酶 基因 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种编码突变芳香基硫酸酯酶H260L的基因,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
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