[发明专利]一种基于SPR技术的吗啡检测方法

摘要

本发明公开一种基于SPR技术的吗啡检测方法。该方法是将SPR芯片经EDC/NHS活化后的羧基基团偶联BSA上的氨基后作为传感芯片，当待测样品通过传感芯片表面时，利用表面等离子体共振检测仪检测待检测唾液与分子识别敏感芯片界面处全反射光的光强变化来直接测定唾液中的吗啡含量。本发明方法检测灵敏度高，大大降低吸毒人员检测的漏检率，提高工作效率，具有重要的应用价值。

主权项

一种基于SPR技术的吗啡检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤：步骤(1)：将SPR芯片放置到SPR仪器中作为传感芯片，步骤(2)：以10～30μL/min的流速往SPR芯片表面通入200～300μLEDC/NHS混合液，活化该芯片表面的羧基基团；步骤(3)：在步骤(2)活化表面羧基后的SPR芯片上以10～30μL/min的流速通入0.5～2mg/mL BSA‑Morphine溶液，使其偶联到活化过的羧基上，要求目标响应值(RU)达到2000～3000；步骤(4)：在步骤(3)BSA‑Morphine偶联后的SPR芯片上以10～30μL/min的流速通入75～100μL乙醇胺盐酸盐溶液，用以封闭未反应的活化过的羧基位点；步骤(5)：在步骤(4)处理后SPR芯片上以10～30μL/min的流速通入30～50μL梯度浓度的吗啡抗体，确定合适的抗体浓度；步骤(6)：将一系列不同浓度的30～50μL的吗啡标准品分别与步骤(5)确定的浓度抗体混合后，以10～30μL/min的流速依次通入SPR芯片，建立标准曲线；其中吗啡抗原与步骤(5)确定的浓度抗体等体积；步骤(7)：将30～50μL的待检测样品与步骤(5)确定的浓度抗体等体积混合后，以10～30μL/min的流速通入SPR芯片，记录响应信号，代入标准曲线，求得唾液中吗啡含量。