[发明专利]矮珍珠的组织培养方法

摘要

矮珍珠的组织培养方法，包括如下步骤：获取外植体并消毒，将消毒外植体分割成带芽茎段接入初代培养基中培养获得不定芽，初代培养第1～7天，每天施加超声场1～2小时，初代培养第8～15天，每天施加超声场4～5小时，将不定芽转移至继代培养基中培养获得继代培养苗，温度为24±2℃，湿度为70～75％，光照时间为10～12小时/天，光照强度为2800～32001x，将继代培养苗转移至生根培养基中培养得到矮珍珠幼苗，生根培养基为：在N₆培养基基础上，另外再添加钼酸铵、TDZ和支链淀粉，最后炼苗与移栽即得。本发明不受季节、温度、地域影响，获得大量的无菌苗，提高种苗的载培成活率，提高产量和品质。

主权项

1.矮珍珠的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)获取外植体并消毒选取健壮植株新生的幼嫩枝芽，自来水洗涤枝芽表面污垢尘土，先酒精浸泡，再升汞消毒，最后无菌水冲洗干净后得到消毒外植体，(2)初代培养将消毒外植体分割成带芽茎段，然后接入初代培养基中培养32～36天获得不定芽，初代培养条件为：温度为24±2℃，湿度为63～68％，光照时间为8～10小时/天，光照强度为2200～25001x，初代培养第1～7天，每天施加超声场1～2小时，超声场功率为8～12W/cm²，超声场频率为20～22KHz，初代培养第8～15天，每天施加超声场4～5小时，超声场功率为15～18W/cm²，超声场频率为25～26KHz；初代培养基为：在ER培养基基础上，再添加碘酸钾0.1～0.5mg/L，添加2,4‑D 0.6～0.8mg/L，添加多效唑1.2～1.3mg/L；(3)继代培养将不定芽转移至继代培养基中培养40～45天获得继代培养苗，继代培养条件为：温度为24±2℃，湿度为70～75％，光照时间为10～12小时/天，光照强度为2800～32001x，继代培养基为：在MS培养基基础上，先将硝酸铵的浓度调整为1200～1300mg/L，另外再添加尿素100～120mg/L，添加ABA3～3.5mg/L，添加吲哚乙酸0.5～0.8mg/L，添加谷氨酰胺5.0～5.5mg/L，添加活性炭200～300mg/L；(4)生根培养将继代培养苗转移至生根培养基中培养20～25天得到矮珍珠幼苗，生根培养条件为：温度为30±2℃，湿度为40～50％，光照时间为12～15小时/天，光照强度为3500～42001x，生根培养基为：在N₆培养基基础上，另外再添加钼酸铵0.01～0.02mg/L，添加TDZ 1.5～2.0mg/L，添加支链淀粉130～150mg/L，用氢氧化钠调节pH为7.0～7.2；(5)炼苗和移栽生根培养结束后，打开培养瓶盖，在自然光下进行开瓶练苗5～7天，然后将矮珍珠幼苗用清水多次冲洗去除残留培养基，移栽至自然水体中。