[发明专利]一种分离纯化高纯度猪圆环病毒Cap蛋白的层析方法在审
申请号: | 201610850930.5 | 申请日: | 2016-09-26 |
公开(公告)号: | CN106432432A | 公开(公告)日: | 2017-02-22 |
发明(设计)人: | 刘为涛;易国军 | 申请(专利权)人: | 武汉汇研生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K14/01 | 分类号: | C07K14/01;C07K1/18;C07K1/16 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司11212 | 代理人: | 杨立;李蕾 |
地址: | 430205 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及一种分离纯化高纯度猪圆环病毒Cap蛋白的层析方法,包括以下步骤:S1:将表达猪圆环病毒Cap蛋白的昆虫细胞破碎离心后,取上清用孔径为0.45μm的滤膜过滤,得到包含猪圆环病毒Cap蛋白的原样品液;S2:使原样品液通过弱阴离子交换层析,得到第一纯化液;S3:使第一纯化液通过强阳离子交换层析,得到第二纯化液;S4:使第二纯化液经历凝胶过滤层析,得到高纯度猪圆环病毒Cap蛋白溶液。该方法可去除从表达猪圆环病毒Cap蛋白的昆虫细胞得到的粗原样品液中的DNA、色素和宿主细胞蛋白,并且将猪圆环病毒Cap蛋白大大浓缩,从而得到高纯度、高浓度的猪圆环病毒Cap蛋白,有利于提高Cap蛋白的免疫原性和反应原性,且降低副作用。 | ||
搜索关键词: | 一种 分离 纯化 纯度 圆环 病毒 cap 蛋白 层析 方法 | ||
【主权项】:
一种分离纯化高纯度猪圆环病毒Cap蛋白的层析方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:将表达猪圆环病毒Cap蛋白的昆虫细胞破碎离心后,取上清用孔径为0.45μm的滤膜过滤,得到包含猪圆环病毒Cap蛋白的原样品液;S2:使所述原样品液通过弱阴离子交换层析,得到去除了DNA和部分宿主细胞蛋白的第一纯化液;S3:使所述第一纯化液通过强阳离子交换层析,得到去除了色素和部分宿主细胞蛋白并且所述猪圆环病毒Cap蛋白被浓缩的第二纯化液;S4:使所述第二纯化液通过凝胶过滤层析,得到高纯度猪圆环病毒Cap蛋白溶液。
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