[发明专利]一种基于EIS结构电化学生物传感器检测1;5-脱水葡萄糖醇的方法

摘要

本发明公开了用电化学生物传感器检测1,5‑脱水葡萄糖醇（1,5‑AG）的方法，首先对硅片表面进行巯基硅烷化，再通过恒电位沉积法使金离子在电极表面电还原形成纳米金，并通过电聚合膜上的巯基使纳米金锚定在该硅片表面，然后将酶PROD固定在纳米金上，利用PROD对1,5‑AG的特异性识别作用，将1,5‑AG捕获至硅片表面。在PROD作用下，1,5‑AG发生分解并产生一种弱还原剂H₂O₂，该还原剂可以使银离子在金纳米颗粒表面发生还原并沉积到金纳米颗粒表面，最后根据得到的I/V曲线，算出ΔV，实现对1,5‑AG的检测。

主权项

1.一种基于电解质‑绝缘体‑半导体结构电化学生物传感器检测1,5‑脱水葡萄糖醇的方法，其特征在于：按照以下步骤进行：步骤1：电解质‑绝缘体‑半导体结构传感器敏感单元的修饰1）将硅片依次在乙醇、丙酮、纯水中超声清洗；2）滴加NaOH溶液，静置后清洗；3）滴加巯丙基三乙氧基硅烷的乙醇溶液于硅片表面，静置，用清水冲洗干净，完成对电解质‑绝缘体‑半导体结构传感器敏感单元的巯基硅烷化；4）在氯金酸溶液中，加入盐酸羟胺溶液反应；5）用PEG‑20000和纯水洗涤氯金酸与盐酸羟胺溶液的反应物，得到纳米金溶液；6）滴加纳米金溶液于巯基硅烷化后的硅基表面，静置，用水清洗；步骤2：电解质‑绝缘体‑半导体结构传感器生物传感界面的构建1）在修饰了纳米金粒子的硅片表面滴加PROD，孵育；2）孵育完成后用纯水将未固定的酶洗去，装配到检测仪器中去，完成电解质‑绝缘体‑半导体结构传感器生物传感界面的构建；步骤3：1,5‑脱水葡萄糖醇的标准曲线绘制1）在固定了PROD的硅片表面滴加标准品进行孵育；2）在孵育得到的硅片表面滴加AgNO3的溶液，避光孵育得到沉积有单质银的敏感单元；3）将敏感单元装配到检测仪器中去，通过Labview测试系统提供电解质‑绝缘体‑半导体结构电容型电化学传感器的偏置电压、驱动信号；并进一步采集电解质‑绝缘体‑半导体结构电容型电化学传感器的输出信号，对采集到的信号进行放大、滤波、转换处理，求光电流有效值，最后绘制输入‑输出特性曲线,得到不同浓度待测样本的I‑V曲线后，计算出ΔV，绘制出的1,5‑脱水葡萄糖醇标准曲线，计算灵敏度和检测限；步骤4：待测样品的检测1）在步骤2得到的固定了PROD的硅片表面滴加待测样品进行孵育；2）在孵育得到的硅片表面滴加用甘氨酸、氢氧化钠配制的AgNO3的溶液，避光孵育得到沉积有单质银的敏感单元；3）将敏感单元装配到检测仪器中去，通过Labview测试系统提供电解质‑绝缘体‑半导体结构电容型电化学传感器的偏置电压、驱动信号；并进一步采集电解质‑绝缘体‑半导体结构电容型电化学传感器的输出信号，对采集到的信号进行放大、滤波、转换处理，求光电流有效值，最后绘制I‑V特性曲线，计算出ΔV；4）根据步骤3所述标准曲线，得到所述待测样品溶液中1,5‑脱水葡萄糖醇的浓度。