[发明专利]免疫球蛋白基因多样性的操纵及多抗体治疗剂

摘要

本发明提供了能表达包含人可变区序列的抗体的改良的非人脊椎动物和非脊椎动物细胞。本发明涉及从非人脊椎动物和细胞中提供长HCDR3。本发明还涉及提供免疫球蛋白重链和轻链基因座中新的V、D和J配对。本发明提供了新的、偏向的抗体多样性及潜在扩展的多样性。本发明还提供了新的和潜在扩展的多样性或者关于抗体共有的可变基因使用的偏向的多样性，可用于治疗和/或预防某些疾病或病症，如感染性疾病。本发明还提供了使用这种脊椎动物产生抗体的方法，以及抗体本身、其治疗组合物及应用。

主权项

分离结合预定抗原的抗体的方法，所述方法包括：(a)提供脊椎动物(任选小鼠或大鼠)；(b)用所述抗原免疫所述脊椎动物；(c)从所述脊椎动物取出B淋巴细胞，选择表达结合所述抗原的抗体的一或多个B淋巴细胞；(d)任选使所述选择的B淋巴细胞或者其后代永生化，任选通过从中产生杂交瘤而永生化；及(e)分离由所述B淋巴细胞表达的抗体(例如，以及IgG型抗体)；其中所述脊椎动物选自：非人脊椎动物(例如小鼠或大鼠)或者非人脊椎动物细胞(例如小鼠细胞或大鼠细胞)，其基因组包含人免疫球蛋白D基因区段库集，所述人免疫球蛋白D基因区段库集偏向于人D2和/或D3家族或者偏向于选自D1‑26、D2‑2、D3‑9、D3‑10、D3‑22、D4‑17、D6‑13和D6‑19的一个、多个或者所有人D基因区段；非人脊椎动物(如小鼠或大鼠)或者非人脊椎动物细胞(如小鼠细胞或大鼠细胞)，其基因组包含人免疫球蛋白VH基因区段库集，其偏向于选自如下一组中的一个、多个或所有基因区段：VH1‑2、VH1‑3、VH1‑8、VH1‑18、VH5‑51、VH1‑69、VH2‑5、VH3‑7、VH3‑9、VH3‑11、VH3‑13、VH3‑20、VH3‑21、VH3‑23、VH4‑4、VH6‑1和VH7‑4‑1；非人脊椎动物(如小鼠或大鼠)或者非人脊椎动物细胞(如小鼠细胞或大鼠细胞)，其基因组包含人免疫球蛋白VH基因区段库集、一或多个人D基因区段及一或多个人JH基因区段，其中所述VH库集不包含选自如下一组中的一个、多个或所有VH基因区段：VH1‑2、VH1‑3、VH1‑8、VH1‑18、VH5‑51、VH1‑69、VH2‑5、VH3‑7、VH3‑9、VH3‑11、VH3‑13、VH3‑20、VH3‑21、VH3‑23、VH4‑4、VH6‑1和VH7‑4‑1；非人脊椎动物(例如小鼠或大鼠)或者非人脊椎动物细胞(例如小鼠细胞或大鼠细胞)，其基因组包含人免疫球蛋白D基因区段库集、一或多个人VH基因区段及一或多个人JH基因区段，其中所述D库集不包含选自如下一组中的一个、多个或所有D基因区段：D1‑26、D2‑2、D3‑9、D3‑10、D3‑22、D4‑17、D6‑13和D6‑19；非人脊椎动物(例如小鼠或大鼠)或者非人脊椎动物细胞(例如小鼠细胞或大鼠细胞)，其基因组包含偏向于人JH6的人免疫球蛋白JH基因区段库集；以及非人脊椎动物(例如小鼠或大鼠)或者非人脊椎动物细胞(例如小鼠细胞或大鼠细胞)，其基因组包含人免疫球蛋白JH基因区段库集，所述人免疫球蛋白JH基因区段库集由一或多个人JH6基因区段组成。