[发明专利]一种针对EML4-ALK融合突变型非小细胞肺癌治疗的复合型智能纳米载药系统及其制备方法

摘要

本发明提供了一种针对EML4‑ALK融合突变型非小细胞肺癌治疗的复合型智能纳米载药系统及其制备方法。该方法针对治疗EML4‑ALK融合突变型非小细胞肺癌的需求，选择ALK和micRNA‑301两个靶点进行基因治疗，通过促进EML4‑ALK型肺癌中抑癌基因BIM的表达从而引起凋亡。本发明采用金纳米壳作为核心，利用化学键将ALK和micRNA‑301的干扰序列连接在其表面，并通过静电吸附作用将阿霉素上载到最外层。这一结构不仅提高了核酸药物的稳定性，还能够在肿瘤部位聚集，实现了热疗、化疗与基因治疗一体化的治疗方式，为治疗EML4‑ALK融合突变型非小细胞肺癌提供了新的方法和思路。

主权项

1.一种针对EML4‑ALK融合突变型非小细胞肺癌治疗的复合型智能纳米载药系统，其特征在于，所述载药系统由金纳米壳、ALK干扰序列和micRNA‑301干扰序列、阿霉素制备得到，并且可通过相应波长的光触发；所述载药系统由如下方法制备获得：在50mL的水加入0.0017g硝酸银和0.007g柠檬酸三钠，搅拌并加热至65℃，反应0.5h后加入0.038g硼氢化钠，继续反应2h；然后将温度降至室温，加入0.0556g盐酸羟胺及0.017g硝酸银，反应过夜；最后，将体系加热至65℃并快速加入1mL浓度为25mM的氯金酸；反应4h后即可得到浓度为1nM的金纳米壳溶液；加入适量PEG提高金纳米壳溶液的稳定性；分别取10μL浓度为10uM的ALK干扰序列及micRNA‑301干扰序列至1mL金纳米壳溶液中，室温搅拌12h后加入100μL的20×SSC溶液进行盐化，反应过夜后12000rpm离心，去掉上清中未连接的干扰序列，在沉淀中加入浓度为0.5mg/mL的阿霉素溶液1mL，室温搅拌24h后12000rpm离心，去掉上清中未吸附上的阿霉素，加入1mL水吹打并离心，反复多次至上清呈无色后加1mL水重悬。