[发明专利]一种高产维生素C-2-磷酸酯的方法有效
| 申请号： | 201610793043.9 | 申请日： | 2016-08-31 |
| 公开（公告）号： | CN106282081B | 公开（公告）日： | 2020-02-11 |
| 发明（设计）人： | 吴静;宋伟;郑凯 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/16;C12P17/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 23211 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江苏省无*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高产维生素C‑2‑磷酸酯的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段从铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中克隆获得磷酸酶基因，将构建好的表达质粒导入E.coli BL21(DE3)，通过卡那霉素抗性平板筛选获得表达载体高拷贝重组的含磷酸酶工程菌。通过组氨酸标签对酶进行纯化，并用于转化维生素C生产维生素C‑2‑磷酸酯。通过控制底物比例，实现维生素C‑2‑磷酸酯的高效生产。在40℃、pH4.5的条件下反应8h，维生素C‑2‑磷酸酯产量可达54.8g/L，转化率为42.9％，时空产率为6.9g/L/h。 | ||
| 搜索关键词： | 维生素C 磷酸酯 生物工程技术领域 分子生物学手段 卡那霉素抗性 铜绿假单胞菌 磷酸酶基因 组氨酸标签 表达载体 表达质粒 高效生产 平板筛选 时空产率 高拷贝 含磷酸 酶工程 底物 构建 克隆 转化 生产 | ||
【主权项】：
1.一种生产维生素C-2-磷酸酯的方法，其特征在于，所述方法是以维生素C为底物，将重组菌培养至OD
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