[发明专利]一种同时检测血液中维生素A和维生素E含量的方法有效
| 申请号： | 201610772145.2 | 申请日： | 2016-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN106442754B | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 倪君君;李玮 | 申请（专利权）人： | 北京和合医学诊断技术股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人： | 周小丽 |
| 地址： | 101111 北京市大兴*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种同时检测血液中(视黄醇)和维生素E(a‑生育酚)含量的方法，包括以下步骤：(一)将全血样本离心，取上清液得血清或血浆，备用；(二)标准溶液的标定；(三)样品前处理；(四)取步骤(三)中上清液样品80μL放入自动进样瓶中经液相色谱法或液相色谱串联质谱进行分析，同时定量检测血液中维生素A(视黄醇)和维生素E(α‑生育酚)的含量。本发明所述的同时检测血液中(视黄醇)和维生素E(a‑生育酚)含量的方法，特异性强、准确度和灵敏度高、分析时间短。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 同时 检测 血液 维生素 含量 方法 | ||
【主权项】：
1.一种同时检测血液中维生素A和维生素E含量的方法，采用液相色谱法进行检测，其特征在于：包括如下步骤：(一)将全血样本离心，取上清液得血清，备用；(二)标准溶液的标定三个以上浓度的标准品的混合标准工作液90ul分别和10ul内标工作液涡旋混混匀，制作标准曲线系列溶液；标准曲线系列溶液在检测前必须进行紫外分光光度计重新标定浓度；所述标准品为视黄醇和α‑生育酚，所述内标工作液为维生素A乙酸酯醇溶液和维生E乙酸酯醇溶液；(三)样品前处理(1)精密移取步骤(二)中所述内标工作液于离心管中，加入到步骤(一)中所述血清；(2)再加入纯水或甲酸水稀释后加入乙醇、甲醇或乙腈溶液，涡旋混匀后高速离心去除蛋白；(3)再加入正己烷萃取，涡旋混匀后离心；(4)然后取上清液后常温N2吹干；(5)加复溶液，涡旋混匀，超声，高速离心，得到上清液样品待测；(四)取步骤(三)中所述上清液样品80μL放入自动进样瓶中经液相色谱法进行分析，使用荧光检测器检测，同时定量检测血液中维生素A和维生素E的含量，所述液相色谱测定条件如下：色谱柱：ZORBAX Eclipse XDB‑C8，5um，2.1mm×50mm柱温：25℃；流动相：纯水‑甲醇，采用梯度洗脱程序；流速：1.0mL/min；进样量：5μL；步骤(四)中所述梯度洗脱程序包括：
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