[发明专利]一种细胞免疫佐剂TSA-41的制备方法及应用

摘要

本发明涉及生物医药技术领域，特别是用于疫苗佐剂的一种细胞免疫佐剂TSA‑41的制备方法及应用。本发明为人工设计一种基因序列SEQ ID NO.1，通过基因工程技术，将SEQ ID NO.1重组基因序列插入大肠杆菌表达系统，通过大肠杆菌高效表达出具有二聚体结构的可溶性重组蛋白TSA‑41，所得TSA‑41重组蛋白通过分离、纯化，最终得到高纯度、高活性的重组蛋白。该重组蛋白作为佐剂可以有效提高细胞免疫类生物疫苗的免疫效果，避免了重组蛋白复性折叠的工艺步骤，大大提高了制备效率，有利于工业化生产。

主权项

1.一种细胞免疫佐剂TSA‑41的制备方法，其特征在于人工设计的一种能在大肠杆菌中表达出具有二聚体结构的可溶性重组蛋白的基因序列SEQ ID NO.1，该基因序列通过下列步骤得到TSA‑41细胞免疫佐剂：(1) 通过基因工程技术将SEQ ID NO.1基因序列插入大肠杆菌表达系统，获得表达SEQ ID NO.1基因的重组大肠杆菌；(2) 将步骤(1)所得重组大肠杆菌进行37℃培养，15‑25℃诱导其表达重组蛋白TSA‑41，获得诱导后的重组大肠杆菌；(3) 将步骤(2)所得诱导后的重组大肠杆菌进行细胞破碎，通过离心获得重组大肠杆菌破碎上清液；(4) 将步骤(3)所得重组大肠杆菌破碎上清液通过镍离子亲和层析柱进行分离纯化，得到TSA‑41重组蛋白初步纯化液；(5) 将步骤(4)所得TSA‑41重组蛋白初步纯化液通过凝胶排阻层析柱进行分离纯化，去除未形成聚体的蛋白，得到TSA‑41重组蛋白纯化液；(6) 将步骤(5)所得TSA‑41重组蛋白纯化液置于透析袋中，用透析液进行透析，获得稳定的TSA‑41重组蛋白，该重组蛋白即为所需的TSA‑41佐剂。