[发明专利]一种澳洲坚果总RNA的提取方法

摘要

本发明公开了一种澳洲坚果总RNA的提取方法，该方法首先以澳洲坚果为供试材料，采集幼嫩叶片，通过预处理、抽提、沉淀、洗涤、去DNA及电泳检测，获得澳洲坚果总RNA。通过本发明的方法获得的澳洲坚果总RNA纯度高、完整性好，缩短了抽提时间，为澳洲坚果的基因克隆和分子水平遗传分析奠定基础。

主权项

一种澳洲坚果总RNA的提取方法，其特征在于包括以下步骤：1)称取澳洲坚果叶片用液氮将其研磨成粉末后转至离心管中，迅速加入预热的2×CTAB于离心管中，在50～75℃的温度条件下进行水浴；2)待步骤1)完成后，立即加入等体积的氯仿/异戊醇(24:1)于步骤1)的离心管中，在3～5℃、10000～12000rpm的条件下离心12～18min；3)将步骤2)的上清液转入新的离心管中，重复步骤2)；4)将步骤3)的上清液转入新的离心管中，加入LiCl溶液，在‑85～‑70℃温度条件下沉淀；5)待步骤4)完成后，在3～5℃、10000～12000rpm的条件下离心25～40min，弃上清，用乙醇洗涤沉淀，吹干，加入30～50μL DEPC水溶解RNA；6)待步骤5)完成后，进行去DNA处理后保存。